白花蛇舌草通过阻滞细胞周期抑制人结肠癌细胞的增殖

2012-08-08魏丽慧林久茂蔡巧燕詹友知王丽丽

福建中医药 2012年4期

彭军，魏丽慧，林久茂，蔡巧燕，詹友知，张铃，王丽丽

（1.福建中医药大学中西医结合研究院，福建福州 350122；2.福建省中西医结合老年性疾病重点实验室，福建福州 350122）

结肠癌是常见的恶性肿瘤之一，目前每年新增发病例数高达120万，其发病率和死亡率在全部恶性肿瘤中居第三位［1］。目前临床上常规治疗大肠癌的方法包括手术切除、化疗、放疗等，但是仍然有50%以上的患者在接受这些传统治疗后发生复发转移，而且5 a 生存率仍然不高［2］。研究表明，导致肿瘤发生的最主要原因是细胞过度增殖与凋亡失调，因此抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡是治疗肿瘤最基本的方法。前期研究发现［3］：白花蛇舌草具有诱导结肠癌HT-29 细胞凋亡的作用，为了进一步阐明其治疗结肠癌的机制，采用MTT、集落形成、RT-PCR、流式分析等方法来研究和探讨白花蛇舌草对结肠癌细胞增殖的抑制作用及其作用机制。

1 材料

1.1 药物和细胞株白花蛇舌草，由福建中医药大学国医堂医院提供，批号：09 072201；结肠癌HT-29细胞，购自上海中科院细胞库。

1.2 试剂 DMEM 培养基、胎牛血清（FBS）和胰蛋白酶（trypsin），Hyclone 公司；四甲基偶氮唑蓝（MTT）干粉，Sigma 公司；细胞周期检测试剂盒，BD 公司；RT 试剂盒、Trizol、PCR 试剂盒，Promega 公司；引物，上海生工生物工程有限公司。

1.3 仪器 B-290 型实验室小型喷雾干燥机（瑞士Buchi）；ELX800 酶标仪（美国BioTek）；3111 CO2培养箱（美国Thermo）；DMIL LED 倒置显微镜（德国Leica）；Gel DOC 2000 型凝胶成像分析系统、APC 300 型电泳仪（美国Bio-Rad）；FACS Calibur 流式细胞仪（美国BD）。