刘会民，张 洁，高金泉，吴 狄（天津市海河医院，天津 300350）

利福喷丁为利福霉素类药物的衍生物，其抗结核分枝杆菌活性比利福平强2～10倍[1]，利福喷丁的最低抑菌浓度（MIC）较利福平普遍低2～4倍[2]，如使利福喷丁血药浓度保持较高水平，对于耐药的结核患者应用利福喷丁治疗仍有一定疗效[3]。目前利福喷丁临床上经常使用0.45 g，每周2次，为了解改变用药方案后利福喷丁是否能达到药物治疗浓度，笔者建立以高效液相色谱法测定利福喷丁血药浓度的方法，为临床采用合理的给药时间提供试验依据。

1 材料

1.1 仪器

LC-10A高效液相色谱仪，包括LC-10A泵、SPD-10A紫外-可见检测器（日本岛津公司）；N-2000色谱工作站（浙江大学智能工程研究所）；KDC-16H型高速离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）。

1.2 试药

利福喷丁标准品（无锡山禾集团第一制药有限公司，含量：92.6%，批号：200507046）；内标：对硝基酚（天津市光复精细化工研究所，含量：100%，批号20040706）；甲醇、色谱水为色谱纯，冰乙酸为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Shim-pack VP-ODS（250 mm×4.6 mm，5µm）；流动相：甲醇-水（70∶30，用冰乙酸调节至pH＝6）；流速：1.0 mL·min－1；检测波长：336 nm；进样量：20 µL。

2.2 血浆样品处理

用加液器准确吸取40 μL含药血浆于带盖塑料小试管内，加入内标液200 μL，混匀，静置5 min后，于高速离心机（10 000 r·min－1）离心5 min，取上清液于450 μm滤头过滤后取20 μL进样分析。色谱图详见图1。

图1 高效液相色谱图A.空白血浆；B.空白血浆+内标；C.血浆样品；1.对硝基酚；2.利福喷丁Fig 1 HPLC chromatogramsA.blank plasma；B.blank plasma+internal standard；C.plasma sample；1.d-nitrophenol；2.rifapentine

2.3 标准曲线的制备

取空白血浆1 mL，加入适量利福喷丁标准品溶液，制得含药血浆，使其浓度分别为 0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0、16.0、32.0 μg·mL－1。按“2.2”项下方法处理，进样测定，记录色谱峰面积，用峰面积对内标峰面积的比值（Y）作纵坐标，血浆样品的浓度（X）作横坐标进样线性回归，得利福喷丁回归方程Y＝9.54X+1.5（r＝0.999 6）。……