王喜超，涂阳科，吕凤岩

(天津市第一中心医院肾内科，天津 300192)

在以往的研究中发现血液透析患者有血管新生［1-2］，本研究的前期中也发现血液透析患者血清体外可以诱导血管新生［3］，并且氧化应激是导致血管新生的一个因素［4］。尿毒症血液透析患者更容易出现严重的心血管并发症，新生血管的丧失而导致的血管功能代偿不全可能为其原因之一。细胞凋亡是细胞的程序性死亡［5］，内皮细胞凋亡可能参与了尿毒症患者新生血管的丧失。而目前未见相关文献报道。本研究通过体外实验，对其进行了初步探讨。

1 材料与方法

1.1 对象

选取天津市第一中心医院1998年09月至2008年10月的11例维持性血液透析患者及相同时期10例健康志愿者，所有对象均签署知情同意书。血液透析患者平均年龄(63.2±4.4)岁，原发病为慢性肾炎、高血压肾病和多囊肾等。所有患者均用碳酸盐透析，每周透析3次，每次4.0 h。采用二醋酸纤维素膜透析器。健康对照组平均年龄(58.3±5.1)岁，均为健康志愿者。两组的年龄、性别组成无统计学差异。

1.2 方法

1.2.1 血清的制备:透析患者在透析中动脉端采血，同时正常对照组清晨空腹采血，取血后立即低温离心(4 000 r/min，20 min)，取上层血清 -70℃保存备用。分别把透析患者血清及健康志愿者血清混合进行实验。

1.2.2 内皮细胞培养及实验分组:HUVECs由重庆医科大学组胚教研室惠赠(来源于美国ATCC公司)，内皮细胞常规培养于含100 mL/L胎牛血清(杭州四季青公司)的RPMI 1640培养基(Gibco公司)，置于37℃ 5%CO2培养箱中孵育。细胞分为实验组和对照组，实验组用含100 mL/L透析患者血清的RPMI 1640培养基，对照组用含100 mL/L健康志愿者血清的RPMI 1640培养基。……