唐东华 周寿红 王成昆 刘红光

1.湖南环境生物职业技术学院外护教研组，湖南衡阳421001;2.南华大学医学院，湖南衡阳4210013.南华大学附属第一医院肿瘤外科，湖南衡阳 421001

乳腺癌是一种严重影响妇女身心健康甚至危及生命的最常见的恶性肿瘤之一，其治疗方式为手术辅以化疗、放疗。化疗是治疗乳腺癌常用的非手术方法之一，但它有着严重副作用。因此，提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性和特异性一直是研究焦点。来曲唑（Letrozol）是第三代非甾体类芳香化酶抑制剂，它能抑制组织中的芳香化酶活性，进而阻止雄激素向雌激素转化，降低血液中雌激素水平，抑制雌激素依赖性癌细胞生长。来曲唑主要用于绝经后晚期乳腺癌，多用于抗雌激素失败后的二线治疗。但是来曲唑与一线抗肿瘤药针对乳腺癌的联用尚未见报道。从2011年11月4日—12月20日，该研究拟采用Balb/c-nu移植瘤模型，评价来曲唑联用环磷酰胺对乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤生长的作用并探讨其机制。

1 资料与方法

1.1 细胞株实验动物、试剂及药品

Balb/c-nu雌性裸鼠40只，6周龄，体重18～20 g，购于中科院上海实验动物中心，SPF级饲养环境由南华大学实验动物部提供。人乳腺癌MDA-MB-231细胞株该研究所保存。来曲唑；环磷酰胺；兔抗人Aromatase、PI3K多克隆抗；免疫组化试剂盒（S-P法），DAB显色剂。

1.2 建立动物模型

将处于对数生长期，汇合度80%～90%的MDA-MB-231乳腺癌细胞瓶内培养基吸弃，用PBS缓冲液洗涤细胞2～3次，胰蛋白酶(0.25%)消化，收集细胞，再次用PBS洗涤，吹打混匀、计数；再以无血清RPMI-1640调整浓度，按每只裸鼠背部皮下接种细胞数1.0×107/0.2 mL细胞悬液注射于裸鼠背部皮下，5～7 d后观察肿瘤移植成功率。……