产异淀粉酶嗜热菌选育及产酶条件的研究
2012-07-10胡先望严晓娟
胡先望 ,陈 朋 ,梁 宁 ,王 雄 ,严晓娟
(1.甘肃省商业科技研究所,甘肃 兰州 730010;2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730070)
异淀粉酶在生化分类上属于淀粉水解酶类(EC3.2.1.68)。它可以从寡聚糖的非还原末端水解切开α-1,6糖苷键,释放出葡萄糖,可广泛应用于淀粉糖浆、啤酒和酒精等的生产。近年来,以淀粉为原料利用酶技术开发出的低聚异麦芽糖因其安全无毒、理化性质独特等优良性质而备受关注[1-2]。异淀粉酶在高浓度的葡萄糖环境中也能将游离葡萄糖残基通过酶催化逆反应将葡萄糖苷转移到另一底物形成α-1,6糖苷键,从而得到非发酵性的低聚糖[3]。以淀粉为原料,经过α-淀粉酶、β-淀粉酶和异淀粉酶(或α-葡萄糖苷酶)的协同作用,可生产低聚异麦芽糖或糖醇,其转化率一般为55%~60%[4]。我国工业用异淀粉酶主要来自进口,近年来国内朱学军[5]、王弋博[6]、夏静[7]、郭宏文等[8-9]分别进行了产异淀粉酶菌种的选育工作,其他关于嗜热异淀粉酶的研究报道则较少。笔者以嗜热脂肪芽孢杆菌为原始菌种,进行诱变及优势菌株选育,并对筛选出的突变菌株的产酶性质做了初步探讨,旨在获得耐高温、活性较高、稳定性较好的产酶菌株。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌 种 嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus,菌种编号 1.1865),购于中国科学院微生物研究所,经诱变处理得到高产异淀粉酶的突变菌株UM761。
1.1.2 仪器与试剂 仪器:TU-1800PC紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)、GL-21M离心机(湖南湘仪离心机仪器有限公司)、MF99-3自动核酸蛋白分离层析检测仪(上海沪西分析仪器厂)、LDZM-75型立式智能压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)、5 L全自动发酵罐(日本B.E.Marubsishi)等。……
