柽柳类锌指基因ThZFL的功能分析1)

2012-07-02曲冠证郑唐春杜兆伟赵思雯夏德安

东北林业大学学报 2012年7期

关键词：烟草

曲冠证郑唐春杜兆伟赵思雯夏德安

(林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)，哈尔滨，150040)

柽柳(Tamarix hispida)是分布在干旱荒漠区域的抗胁迫性较强的生态植物，除具有抗干旱能力外，还主动将积累的盐分储存在液泡中而实现区隔化［1－2］。因此，柽柳是进行林木抗逆研究的理想物种。通过对柽柳cDNA文库的测序及Blast比较分析，获得了一个具有完整开放读码框的基因序列(GenBank No.EG971462)，其与拟南芥中命名为C2H2 型锌指蛋白(AT5G16470，AT3G02790，TAIR)的基因具有较高的相似性(氨基酸序列相似性约为80%)。植物锌指蛋白是一类广泛研究的抗逆性基因蛋白，例如在胡椒中克隆的新基因CaAbsi1、从菊花中分离的DgZFP基因和锌指蛋白基因Tsip1转烟草中都对NaCl、干旱、冷冻及激素等胁迫产生应答反应［3－5］。但通过对 SwissProt数据库进行 Blast未发现有相似的已知植物蛋白基因，因此可以认为此基因为一个新基因，故暂时命名该基因为ThZFL(Tamarix hispida Zinc finger like gene)［6］。

本试验在前期的试验基础上，对转基因烟草植株进行盐胁迫、干旱胁迫处理，探究ThZFL基因在应对非生物胁迫的生理功能。通过酵母双杂交技术，筛选与ThZFL基因表达的蛋白具有相互作用的蛋白，为研究蛋白质与蛋白质间的相互联系提供支持，也为探究新基因的生理功能提供理论依据。通过克隆ThZFL基因的启动子，转化拟南芥分析表达规律，为进一步探究该基因的生理功能、分析抗逆机制的形成提供理论依据。