孙 倩 杨 玲 沈海龙 李玉花 黄 剑

(林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)，哈尔滨，150040)

水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)是木犀科白蜡树属大乔木树种，主要分布于我国东北，是著名的东北“三大硬阔”之一的优质用材树种。在水曲柳体胚发生研究中发现，利用合子胚为外植体可以诱导产生水曲柳体胚［1－3］，但产生体胚过程中伴随着外植体的褐化现象，发生体胚的外植体基本上都处于褐化状态，而且褐化外植体上诱导出的体胚长势良好［4］。进一步研究证实，水曲柳体胚发生与外植体褐化的伴随关系较固定，诱导产生的褐化有利于其体胚发生［5－6］。褐化是指外植体或培养材料接种后，在组织培养过程中由于切割造成机械损伤，伤口处分泌出酚类化合物，在有氧的条件下，切面细胞中的酚类物质由多酚氧化酶催化氧化为醌，醌再通过非酶促反应产生有色物质而导致组织褐变，变成棕褐色或暗褐色，并逐渐扩散到培养基中，抑制细胞内其它酶的活性，影响细胞的正常代谢，毒害整个组织，甚至导致组织死亡;尤其是木本植物组织的外植体，褐变死亡是其培养难度较大的主要因素［7－9］，因而大部分组织培养过程都需要抑制外植体的褐化。李官德等［10］的研究提到，棉花的褐化且生长缓慢的愈伤组织能分化出体胚，并再生成植株。蓝桉体胚发生的研究中发现，在培养基中添加抗氧化剂并不能显著降低外植体的褐化程度，但使用降低褐化程度的抗氧化剂则可抑制体胚的发生，同时降低了多酚的积聚［11］，认为多酚的积聚在体胚发生中具有一定作用，只是这种作用尚不为人知。……