吴书景 池玉杰 闫洪波

(东北林业大学，哈尔滨，150040)

锰过氧化物酶(MnP;EC1.11.1.13)是一种依赖H2O2的含Fe3+的血红素五聚体糖蛋白酶，同时也是一种常见的降解木质素的过氧化物酶，广泛存在于白腐菌中，在真菌降解木质素的非特异性细胞外氧化还原酶中起着至关重要的作用。由于MnP对酚类和非酚类木质素和多环芳烃等多种异生物质都具有独特的降解能力，它能够有效地降解废水和土壤中很难被降解的多氯联苯、多环芳烃、DDT、染料、炸药和其它氯化物等，因此这种酶在生物制浆、污水处理等生物技术应用中具有重要意义。Lenzittes gibbosa是东北地区常见的一种白腐菌，也是一种生长速度较快、对木材和木质素分解能力较强的白腐菌，笔者及其小组以前的研究表明这种白腐菌能够产生锰过氧化物酶和漆酶［1］，并首先克隆到了该菌种的MnP基因［2］。笔者根据本研究小组已克隆到的L.gibbosa MnP1 cDNA全长基因Lg-mnp1，利用染色体步移法首先克隆到了Lg-mnp1上游的启动子序列。对L.gibbosa MnP1基因Lg-mnp1启动子的克隆有助于进一步深入研究mnp表达调控的关系，同时也为外源基因表达载体系统的构建提供了重要依据。

1 材料与方法

1.1 菌种来源与培养

白腐菌(Lenzittes gibbosa)菌株CB1采自长白山，自行分离得到，保存在东北林业大学森林保护学科森林病虫病理实验室。试验前在PDA斜面培养基上培育的菌种冷藏于4℃冰箱。挑取小块试管内的菌种，接种于PDA平板培养基上，于28℃下培养7 d。

1.2 基因组DNA的提取

取长势较旺的一皿菌丝体，刮取新鲜菌丝，使用TIANGEN公司的 DNAquick_快捷型植物基因组DNA提取系统及相关方法提取真菌基因组DNA。……