翟晚枫 张春水，高利生

（中国人民公安大学刑事科学技术系，北京 100038） （公安部物证鉴定中心，北京 100038）

公安办案中鸦片的前处理方法研究*

翟晚枫 张春水，高利生

（中国人民公安大学刑事科学技术系，北京 100038） （公安部物证鉴定中心，北京 100038）

确定适合公安办案的鸦片样品前处理的首选方法，为鸦片类收缴毒品的提取、检测提供参考。分别采用不同前处理方法提取鸦片中吗啡组分，采用高效液相色谱法检测，依据经济成本、提取效率、回收率等多种因素选定前处理方法，并对该方法进行优化。公安办案中对于鸦片的前处理方法首选水溶解法，固相萃取法可以作为水溶解法的补充。采用优化后的水溶–固相萃取方法，国产固相萃取小柱可以得到98.7%的回收率。进口固相萃取小柱的萃取效率略优于国产柱，而国产固相萃取小柱也能够满足检测要求。

前处理；鸦片；吗啡；固相萃取

鸦片的主要有效成分为吗啡，是公安机关重点监控和打击的毒品之一。对于鸦片样品的前处理，目前常用的方法有直接溶解法、液液萃取法［1］、固相萃取法［2–5］、超临界流体萃取法［6］等。为更好地服务于办案工作，笔者考察、比较了前3种方法，并确定了公安办案中的首选方法。超临界流体萃取法由于步骤繁琐、仪器昂贵故未作考察。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

液相色谱仪：Prominence UFLC型，日本岛津公司；

固相萃取小柱：C18型（天津富集科技有限公司），Sep-Pak Vac型（美国waters公司）；

纯水仪：Synergy UV型，美国Millipore公司；

盐酸吗啡标准对照品：纯度99%，中国药品生物制品检验所；

乙腈、甲醇、庚烷磺酸钠：色谱纯，美国Fisher Scienti fi c公司；

磷酸二氢钾：分析纯，中国西陇化工股份有限公司；

甲醇、氯仿：国药集团化学试剂有限公司；

蒸馏水：屈臣氏蒸馏水（用于前处理过程）；

去离子水：屈臣氏蒸馏水再经Millipore公司Synergy UV型纯水系统制备（配制液相色谱流动相）。

1.2 对照品储备溶液的制备

精密称取盐酸吗啡标准品10.00 mg，加入甲醇定容至10 mL，制成含盐酸吗啡1.00 mg/mL的对照品储备溶液。

1.3 供试品溶液的制备

称取若干份鸦片烟膏，每份约10 mg，分别加入10 mL溶剂溶解，超声15 min，离心后取上清液，供固相萃取实验使用或直接使用高效液相色谱分析。

1.4 色谱条件

色谱柱：Inertsil ODS–SP(150 mm×4.6 mm，5 μm，日本岛津公司)；流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾、0.002 5 mol/L庚烷磺酸钠水溶液–乙腈；流动相梯度程序：以6%有机相（乙腈）为初始浓度，即0.05 mol/L磷酸二氢钾、0.002 5 mol/L庚烷磺酸钠水溶液–乙腈（体积比为94∶6），以每分钟2%升至26%，然后以每分钟9%升至35%，保持10 min。流速1 mL/min；柱温：35℃；检测波长：220 nm。

2 结果与讨论

2.1 溶解和液液萃取方法的选择

在毒品的定量分析中，最大程度地将毒品组分从固体中转移到液体中是保障定量结果符合真实值的前提，分别比较了水溶解法、甲醇溶解法、反提法、磷酸缓冲液提取、不同pH值的盐酸水溶液提取（pH 3.1～7.4，20个点）等方法。按不同方法提取，液相色谱分析并将称取样本的质量归一化，结果如表1所示。

表1 不同提取方法的提取结果

实验表明，甲醇对吗啡的溶解能力略高于水，同时明显好于反提法；pH值对水提取法的效果影响小且在pH 3.2～7.7范围内无显著规律。甲醇溶解法溶解的杂质较多，而水溶法提取效率与甲醇溶解法差距不大。此外，考虑到固相萃取常用的C18萃取小柱主要是通过目标物与吸附剂之间的疏水作用力实现吸附，若溶解时选用甲醇，吗啡很难被C18固相萃取小柱保留，而溶解时选用水则可以直接用固相萃取法，无需反提。综合考虑以上因素，将水溶解法确定为样品前处理的基本方法。

2.2 固相萃取方法的确定

考虑到鸦片样本的复杂性，即办案中缴获的样本可能含有很多未知杂质，本实验进一步开发和优化了固相萃取方法。

2.2.1 固相萃取小柱活化方法

实验采用两种活化试剂依次对固相萃取小柱进行活化［7］。试剂I：甲醇–水（体积比为3∶1），活化试剂II：水。对试剂I的用量进行考查，当用量分别为3，5，7，10 mL时，回收率分别为78.2%，94.4%，98.2%，98.3%（回收率计算结果由固相萃取的吗啡组分峰面积除以同体积水溶液直接溶解同质量鸦片样品的吗啡组分峰面积得到）。可见，试剂用量达到7 mL时已经足够。对于活化试剂II水的用量，由于活化后需用氨水润洗，其用量对实验效果影响不明显，按经验值选择3 mL。

2.2.2 碱化上样方法

由于鸦片膏中的吗啡多以吗啡碱或盐的形式存在，因此在上样前需用氨水润洗小柱并在上样时将样品调至碱性，以使其以碱的形式与C18填料充分结合并且不易被淋洗液洗脱。对于氨水体积分数的选择，设计实验取0～1%间的6个点，分别以2 mL润洗小柱，上样液为2 mL样品加0.5 mL相应体积分数的氨水，结果如图1所示。由图1可知，只需要少量氨水即可获得大于99%的高回收率。

图1 氨水体积分数对固相萃取回收率的影响

2.2.3 淋洗与洗脱方法

实验分别考察了以3，5，7，9，11 mL水作为淋洗剂的效果，从谱图来看，杂质峰数量和面积无显著差异。对于洗脱液，分别考察了氯仿和含10%甲醇的5%乙酸的洗脱效果［7］，后者优于前者，且减少了挥干复溶的步骤，更加简便。分别以3，4，5，6 mL含10%甲醇的5%乙酸润洗小柱，实验表明以3 mL润洗时回收率已超过98%，为了保险，选择5 mL作为洗脱液体积。

2.2.4 前处理方法的确定及回收率考察

实验比较了水溶解法与SPE固相萃取法的提取效率，多次测量得到固相萃取方法回收率平均值为98.7%（n=10），能够满足检测要求，并且减少了杂质。因此，在杂质较多、有效成分较少、水溶解法不能满足要求时，固相萃取法可以作为水溶解法的补充方法。最终确定固相萃取方法为：选用甲醇–水（体积比为3∶1）的混合液7 mL、水3 mL活化小柱，2 mL 0.1%氨水冲洗小柱，上样2 mL并在样品溶液中加入0.1%氨水1～2滴，7 mL水淋洗，5 mL含10%甲醇的5%乙酸洗脱。

实验中还将国产和进口萃取小柱的萃取效果进行了比较。分别取国产固相萃取小柱6支、进口固相萃取小柱6支，按1.3方法配制成供试品溶液。采用上文所述的固相萃取方法，测得国产固相萃取小柱回收率为98.5%、进口固相萃取小柱回收率为99.9%。由此可见，进口固相萃取小柱略优于国产固相萃取小柱，而国产固相萃取小柱已经可以满足实验需要，各实验室可以根据自身情况选择不同的固相萃取小柱。

3 结语

司法办案中对于鸦片（烟膏）的前处理方法首选水溶解法，固相萃取法可以作为水溶解法的补充。使用国产固相萃取小柱可以得到98.7%的回收率，能够满足要求，进口固相萃取小柱略优于国产柱。

［1］ 王越，马丽霞，田微.火锅底料中罂粟壳的高效液相色谱法测定［J］.色谱，1999，17(4): 401–402.

［2］ Wu Zhanpin. A simple and rapid method for the extraction of five major alkaloids from opium. Forensic Science International［J］.1994，64(2–3): 103–106.

［3］ 黄贞子，于晓英，贾薇.固相萃取净化–反相HPLC法测定调料中5种阿片生物碱［J］.环境与健康杂志.2000，17:30–31.

［4］ 陈建军.固相萃取–反相高效液相色谱法测定火锅中吗啡和可待因［J］.实用预防医学，2006，13(3): 766–767.

［5］ 李咏杰，孙伟，张新威，等.罂粟壳中吗啡提取方法的研究［C］.第二届全国毒品检验技术交流会论文集.北京：群众出版社，2005: 60–67.

［6］ Janicot J L，Caude M，Rosset R. Extraction of major alkaloids from poppy straw with near-critical mixtures of carbon dioxide and polar modi fi ers［J］. Journal of Chromatography，1990，505: 247–256.

［7］ 李永庆，陈蕾，赵文，等.中国药典中阿片系列品种吗啡含量测定方法的研究与建立［J］.中国药品标准，2004，5(1):18–21.

Study on Pre-Treatment Methods of Opium in Handling Cases

Zhai Wanfeng
（Department of Forensic Science， Chinese People’s Public Security University， Beijing 100038， China）
Zhang Chunshui， Gao Lisheng
（Institute of Forensic Science Ministry of Public Security P.R.C.， Beijing 100038， China）

The preferred method of morphine determination in handling cases concerning opium was determined，which can be helpful to the extration and analysis of opium in the practice of handling cases. Morphine was extracted by different pre-treatment methods from opium，and analyzed by high performance liquid chromatography. Considering the cost，extraction ef fi ciency，recovery and other factors，the preferred method was determined and optimized. The preferred method of morphine determination in handling cases was water-dissolving，and then the optimized SPE method was an assisted one. Using domestic solid-phase extraction(SPE) columns and the optimized water-dissolving-SPE mothod，the recovery reached 98.7%. The ef fi ciency of imported SPE columns was slightly higher than domestic one，which was also able to meet the testing needs.

pre-treatment; opium; morphine; solid-phase extraction

O657.7+2

A

1008–6145(2012)03–0028–03

10.3969/j.issn.1008–6145.2012.03.008

*公安部重点研究计划支持项目（2009ZDYJGAES024）

联系人：翟晚枫；E-mail: betty871211.student@sina.com

2012–01–31