龚 军，郑俏伟，王建华，杨 凤，汪招雄，廖 明，任 涛

（华南农业大学兽医学院 农业部动物疫病防控重点开放实验室广东省动物源性人畜共患病预防与控制重点实验室，广东 广州 510642）

鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis，IB）是鸡的一种急性、高度接触性、病毒性传染病，目前该病已呈世界范围流行，成为严重危害世界养禽业的重大传染病之一[1－2]。鸡传染性支气管炎的病原是传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV），该病毒属于冠状病毒科（Coronaviridae），为有囊膜的单股正链RNA病毒[1]，其主要的功能蛋白为纤突（spike，S）蛋白、膜（membrane，M）蛋白和核衣壳（nucleocapsid，N）蛋白，S蛋白包括纤突蛋白1（spike1，S1）和纤突蛋白2（spike2，S2）两个亚单位，其中S1蛋白是主要识别蛋白，与病毒的致病性相关。IBV在血清学和致病力方面都存在着差异，已报道的IBV血清型有30多个，其中包括引起呼吸道症状的血清型和肾病变的血清型，腺胃型、肠型、混合型正在研究之中[3]。这些血清型之间没有或仅有部分交叉免疫性，同时由于新的血清型不断出现，给本病的诊断和防控带来很多困难[4－6]。本研究从华南地区分离了6株IBV，并对其生物学特性进行了鉴定，最后根据分离株S1基因序列，分析IBV的遗传进化，对鸡传染性支气管炎的防控有重要的意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 毒株及鸡胚 各广东分离株标号为GD－09II，GD－09III，GD－10I，GD－10II，GD－10III，GD－10IV，分离株背景见表1。

表1 分离株编号和背景Table1 Number and background of isolated strains

新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）La Sota疫苗株为作者实验室保存毒株。

9日龄～11日龄无特定病原体（specific pathogen free，SPF）鸡胚购自广东永顺生物制品有限公司。

1.1.2 试剂 TRizol、M－MLV反转录酶、RNasin、dNTP，上海英潍捷基贸易有限公司产品；……