基于仿双酶原位产生共反应试剂而构建的超灵敏电致化学发光免疫传感器
2012-06-26王海军柴雅琴
王海军,袁 若,柴雅琴
(西南大学化学化工学院,重庆400715)
0 引言
电致化学发光 (ECL)主要是通过电化学手段,利用检测体系中某些化合物在电极表面通过电子迁移反应生成不稳定的激发中间态,当激发态跃迁回基态时产生光辐射[1~2]。ECL最近成为了一种重要的,并且受到很大关注的检测方法,这是由于ECL具有简单、快速、高灵敏等优点。Ru(bpy)32+、鲁米诺(luminol)和量子点是三种常见的发光试剂。然而,基于这些常见的发光试剂的生物分析有一些局限性:Ru(bpy)32+的多位点标记会降低生物分子的活性,luminol在接近体液环境的条件下光信号很低,量子点用于生物分析的灵敏度非常低。因此,探索新型的ECL体系应用于免疫分析是非常必要的。Koval’chuk工作小组曾经观察到S2O82-水溶液的发光现象,并提出其可能的反应机理[3]。然而,大量的工作集中于研究S2O82-水溶液的发光机理,由于其发光信号较低,将S2O82-水溶液这一发光体系应用于免疫分析的报道非常少。所以,将S2O82-水溶液应用于免疫分析首要解决的问题是增强其光信号,提高反应灵敏度。
甲胎蛋白(AFP)是国际公认的肿瘤标志物,可用于诊断肝癌,当AFP含量高于20 ng/mL即可怀疑为肝癌[4]。据统计,健康成人体内AFP的平均含量低至3.4 ng/mL,肝癌病人体内AFP含量为4.2~57.5 ng/mL[4]。因此,为了满足临床诊断需要,AFP的检测方法应当具有宽线性范围和高灵敏度。
在此工作中,构建了新型的基于S2O82-水溶液的ECL免疫传感器,磷酸缓冲液(PBS)配制的S2O82-溶液作为检测底液。首先,在玻碳电极表面沉积一层纳米金,通过纳米金与生物分子之间的特殊作用将抗体修饰于电极表面。……
