孔德荣，张小明，赵星梅，张岩滨，胡海涛，王体宾，李 峥，袁 海，赵青霞，胡 雄，霍 军，周梦煜，高新立，宋春联，李恒芬

1)郑州市第八人民医院郑州450006 2)新乡医学院应用心理系新乡453003 3)郑州大学第一附属医院精神医学科郑州450052

载脂蛋白 E(apolipoprotein E，APOE)［1］是人体内主要的脂蛋白之一，它有3种异构体(即ε2～4)和6种基因型(E2/2、E2/3、E2/4、E3/3、E3/4、E4/4)，在人脑中分布广泛，主要由星形胶质细胞合成，通过调节脑内胆固醇及其脂类物质的代谢而参与神经系统的正常生长和损伤修复，从而维持脑部结构和功能的正常。研究［2-3］发现，APOE基因与血管性痴呆和阿尔茨海默病的认知功能缺陷均有关，而临床中发现多达50%的精神分裂症患者存在广泛的认知缺陷［4］，且有研究［5］报道精神分裂症患者存在中枢神经元的丢失和脑边缘系统结构的异常，提示APOE基因可能参与了精神分裂症的发病。作者探讨了精神分裂症患者APOE基因多态性分布，报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2009年1月至2010年9月于郑州市第八人民医院就诊的首发精神分裂症患者180例，其中男116例，女64例，均未服用过任何抗精神病药物，符合《国际疾病和相关健康问题统计分类第十版》精神分裂症的诊断标准，年龄18～55(29.51±4.55)岁，病程不限。健康对照组为郑州市第八人民医院职工，既往无重大躯体疾病史，无神经精神疾病史，无神经精神药物服用史，共180例，其中男 102例，女 78例，年龄 20～53(28.92±4.36)岁。该研究经医院伦理委员会专家论证同意，患者监护人和健康对照者签订知情同意书。

1.2 精神症状的评定 根据Andreasen和Olsen评定标准［6］，对研究组采用阴性和阳性症状量表评定精神症状，量表评定由两名统一培训的主治医师进行操作。将阳性量表中有3项或以上评为中度(4分或以上)、但阴性量表评为中度的项目不足3项者纳入“阳性症状组”;将阴性量表有3项或以上评为中度、但阳性量表评为中度的项目不足3项者纳入“阴性症状组”;两个量表均至少有3项评为中度者纳入“混合型”，被排除。评分结果显示，阳性症状组有59例，阴性症状组有74例。

1.3 APOE基因多态性的测定 收集研究组和健康对照组的外周静脉血3 mL，－80℃冰箱保存，采用美国QIAGEN公司提供的FlexiGene DNA试剂盒提取DNA，严格按照试剂盒说明书进行操作。APOE上游 引 物 序 列 5’-TAAGCTTGGCACGGCTGTC CAAGGA-3’，下游引物序列 5’-ACAGAATTCGC CCCGGCCTGGTACAC-3’［7］，反应体系 50 μL。PCR反应条件:95℃预变性5 min;98℃变性30 s，55℃退火50 s，72℃延伸50 s，35个循环;72℃延伸10 min。将PCR产物送上海博尚生物技术有限公司进行单向测序，与标准序列对比，判定基因多态性。根据APOE基因第4外显子的112位和158位编码氨基酸密码子碱基的不同，共检测出5种基因型，分别为 E2/2、E2/3、E2/4、E3/3、E3/4 和 E4/4。

1.4 统计学处理 采用SPSS 17.0进行分析。各组基因型和等位基因分布的比较应用行×列表χ2检验，两两比较应用行×列表分隔χ2检验，检验水准 α =0.05。

2 结果

2.1 研究组和健康对照组APOE基因型及等位基因分布的比较 经拟合优度χ2检验，研究组与健康对照组基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ2=4.576，P=0.433;χ2=0.579，P=0.979)。2组APOE基因型及等位基因分布的比较见表1。

2.2 研究组男、女患者APOE基因型和等位基因频率分布的比较 见表2。

2.3 阳性症状组、阴性症状组APOE基因型和等位基因分布的比较 见表3。阴性症状组ε4等位基因及E3/4基因型频率显著高于阳性症状组，差异有统计学意义 (χ2=4.417，P=0.036;χ2=13.175，P ＜0.001)。

表2 研究组男、女患者APOE基因型和等位基因分布的比较 n(%)

表3 阳性症状组、阴性症状组APOE基因型和等位基因分布的比较 n(%)

3 讨论

该研究未发现精神分裂症患者与健康人群的APOE基因型及等位基因分布有差异，与Kecmanovic 等［8］和 Tovilla-Zárate 等［9］的报道一致。Kecmanovic等研究发现APOE基因型对塞尔维亚人精神分裂症的发病风险、治疗以及发病年龄均无明显影响，Tovilla-Zárate等所做的一项meta分析也发现APOE基因多态性与精神分裂症的发病无关。然而Liu等［10］将1 570例精神分裂症患者与1 528例健康人进行了对照研究，发现患者中ε4等位基因频率高于健康人群，而ε3等位基因频率及E3/3基因型频率则低于健康人群;刘铁榜等［11］通过对235例首发汉族精神分裂症患者和75例汉族健康人的对照研究也发现ε4等位基因和E3/4基因型与精神分裂症存在正关联。

以阴性症状为主的精神分裂症常伴有脑的结构改变和不可逆地慢性进行性衰退，往往具有难治性特点。Martorell等［12］研究发现携带ε4等位基因的女性患者发病年龄要较男性患者提前4 a，且这些女性患者多以阴性症状为主。刘铁榜等［11］研究也发现难治性精神分裂症患者E3/4基因型和ε4等位基因频率均高于非难治组，且认为阴性症状是引起难治性的首要因素。Akanji等［13］对207例精神分裂症患者和165例健康人群进行了研究，发现E2/3基因型及ε2等位基因在男性患者中似乎更常见，但这种差异无统计学意义。该研究未发现男女精神分裂症患者间APOE基因多态性存在差异，但以阴性症状为主的精神分裂症患者E3/4基因型和ε4等位基因频率高于阳性症状者。

综上所述，APOE基因多态性对精神分裂症易感性及性别的易感性均无影响，但对精神分裂症的临床症状表现有影响，尤其E3/4基因型和ε4等位基因可能是导致精神分裂症阴性症状严重的危险因素，进而推测可能是导致精神分裂症难治性和预后不良的危险因素。但由于APOE基因多态性存在种族遗传异质性，不同种族的研究结果不一致，即使是同一种族的研究，由于样本量的大小、诊断标准及评定工具的选择以及统计方法等的不同，研究结果也有较多争议，因此APOE基因多态性与精神分裂症的关系有待于进一步的研究证实。

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