冯才伟 ，朱君红 ，王会玲 ，罗晓琴 ，崔廷婷

（1.北京勤邦生物技术有限公司，北京 102206；2.河南众品食业股份有限公司，河南 长葛 461500）

目前，对动物源性食品中磺胺类药物的残留分析主要采用微生物法、理化法（HPLC、GC-MS、LC-MS/MS等）和免疫法（酶联免疫法、免疫层析法等）。酶联免疫法作为一种快速筛选方法，具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点，适用于现场监控和大量样本的筛查，目前已在农药、兽药残留检测中得到广泛应用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样本与试剂 猪肉：市售；磺胺“十五合一”ELISA检测试剂盒：北京勤邦生物技术有限公司生产，其中包括包被有偶联抗原的96孔酶标板，浓度分别为0、1、3、9、27、81μg/L 的磺胺嘧啶标准液，酶标二抗，抗体工作液，底物液A液和B液，终止液，20×浓缩洗涤液，2×浓缩复溶液；磺胺类药物标准品：纯度≥99%，美国Sigma公司生产；乙腈、正己烷、氢氧化钠：分析纯，北京化学试剂公司生产。

1.1.2 仪器与设备 8010S匀浆机，2000SBL电子天平，KS-Ⅱ振荡器，Anke GL-20G-Ⅱ高速离心机，DSY-Ⅲ氮吹仪，QL-901漩涡混合器，微量移液器（单道 20～200μL、100～1000μL，多道 50～300μL）：MK3 酶标仪，Acquity液相色谱串联质谱仪（配有电喷雾离子源）。

1.2 方法

1.2.1 样品前处理 称取2.0g±0.05g匀浆后的样本至50mL聚苯乙烯离心管中，加入8mL乙腈-NaOH（0.1mol/L）溶液，立即用振荡器振荡5min，以4000r/min室温（20～25℃）下离心5min后，取2mL上清液至10mL干净玻璃试管中，于50～60℃水浴氮气流下吹干；加入1mL正己烷，用漩涡混合器涡动30 s溶解干燥残留物，再加入0.5mL复溶液工作液，涡动30s后转入2mL离心管中，4 000 r/min室温（20～25℃）下离心5min；除去上层正己烷相，取下层水相50μL用于分析。

1.2.2 检测步骤 取出所需数量的微孔板，记录标准品和样品的位置；……