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HSVⅡ-DNA在生殖器疱疹检测中的应用价值分析

2012-06-13姚鹏,李芃

中国实验诊断学 2012年7期
关键词:检测方法

姚 鹏,李 芃

(华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院 皮肤科,湖北 武汉430014)

生殖器疱疹(GH)由单纯疱疹病毒(HSV)引起的性传播疾病,可通过胎盘及产道感染新生儿,导致流产及新生儿死亡,与宫颈癌的发生也相关。单纯疱疹病毒(HSV)分Ⅰ型(HSVⅠ)和Ⅱ型(HSVⅡ)。HSVⅡ是生殖器疱疹的主要病原体,90%的生殖器疱疹病例都是有HSVⅡ引起的。因此,HSVⅡ的检测对于临床生殖器疱疹的诊断具有重要意义。本文采用FQ-PCR技术检测生殖器疱疹患者的HSVⅡ-DNA,对该方法对于生殖器疱疹诊断的临床意义进行探讨,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2009年4月至2011年4月我院性病门诊收治的106例患者,依据其临床表现及血清抗HSV-2检测诊断初步诊断为GH。男69例,女37例,年龄18-67岁,平均年龄31.2岁。病程2天-4年,<10天者59例,10天~30天者31例,>30天者16例。患者均符合以下诊断标准[1]:①患者本人或配偶有不洁性接触史。②生殖器部位有典型簇集状水疱、脓疱或点状糜烂、溃疡、结痂等典型皮损或在生殖器部位出现红斑、丘疹、皲裂等非典型皮损。

1.2 方法

1.2.1标本采集用无菌棉签擦取皮损部位液体组织液或阴道分泌物,置0.5ml生理盐水中。另采集少量标本,立即浸入0.5ml病毒移送液内-70℃冰箱保存,备用。同时抽取患者静脉血2mL,离心,取血清备用。

1.2.2HSVⅡ检测 ①HSVⅡ-DNA的检测:参考邓念华等建立的实时PCR检测HSVⅡ的方法[2],采用深圳匹基生物工程公司提供的试剂盒,在HSV-DNA聚合酶基因保守序列设计引物进行FQPCR检测,严格按照试剂盒说明书进行操作,采用全自动荧光定量分析仪。②HSVⅡ抗体检测:采用美国Trinity公司提供的HSVⅡ酶联免疫试剂盒,具体操作严格按照试剂盒说明书进行,采用美国Hyperion-MR公司的酶标仪检测血清样本中HSVⅡ抗体。……

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