陈宗艳，李传峰，高景鹏，朱英奇，王玢瑸，杨宗伟，刘光清

(中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241)

鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）能引起雏鹅发生一种急性或亚急性的败血性传染病，以急性肠炎以及心、肝、肾等实质脏器发生炎症为主要特征，病死率较高，俗称“小鹅瘟”[1,2]。GPV为细小病毒科依赖病毒属成员，基因组为单股线性DNA，由5106个核苷酸组成，含有2个主要开放阅读框架（open reading frame, ORF）[3,4]。ORF1编码2个非结构蛋白：Rep1和Rep2，ORF2编码3个结构蛋白：VP1、VP2、VP3。其中，VP2基因全长1764 bp，是组成GPV衣壳的主要成分，可以自我装配成病毒样颗粒（virus-like particles，VLPs）[5,6]。此外，研究表明，VP2内含有病毒的主要抗原决定簇，可以诱导机体产生免疫反应，同时也是中和抗体作用的靶蛋白[7]。

由于GPV具有严格的种属特异性，无合适的传代细胞系培养。因此，不能用传统方法研制其细胞灭活疫苗。通过禽胚连续传代方法，致弱GPV以研制的弱毒疫苗则存在毒力返强的潜在风险，同时生产成本也偏高，加之种鹅和雏鹅所用疫苗不同，大大限制了此类疫苗的生产和应用。因此，研制新型GPV疫苗已成为必然趋势[8,9]。大量研究证明，VLPs在形态上与真正病毒粒子相同或相似，可以模拟成熟病毒刺激机体产生强烈的特异性体液免疫和细胞免疫；此外，由于VLPs不含有核酸，在体内无引发感染和发生病毒基因与宿主染色体基因整合等优点，因此，以之作为预防性疫苗非常安全，具有较好的应用前景[6,10]。本研究即根据GPV VP2蛋白可以自我组装成VLPs的特性，利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞中表达GPV的病毒样颗粒。……