郭晓晔杨东升马长华王文全黄建梅尹玉山

（1北京市宣武中医院药剂科，北京100050；2北京中医药大学中药学院，100102；3易县太行植物开发有限公司，河北保定，074200）

不同干燥加工方法对知母化学成分含量的影响

郭晓晔1杨东升2马长华2王文全2黄建梅2尹玉山3

（1北京市宣武中医院药剂科，北京100050；2北京中医药大学中药学院，100102；3易县太行植物开发有限公司，河北保定，074200）

目的：揭示各种干燥加工方法对知母有效成分含量的影响。方法：分别采用晒干、阴干、烘干、远红外干燥、微波干燥的方法对知母进行干燥加工，以菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ、芒果苷、新芒果苷为指标，通过高效液相色谱法（HPLC），分析各种干燥加工条件下知母中各类指标成分的含量变化情况。其中菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ采用高效液相蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）进行检测，用外标两点法对数方程计算含量，芒果苷、新芒果苷采用高效液相紫外检测法（HPLC-UV）检测。结果：采用烘干、远红外干燥、微波干燥方法加工后，知母菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ、芒果苷含量与晒干、阴干相比均有不同程度上升，新芒果苷含量与晒干、阴干相比有所下降。结论：从有效成分保存方面考虑，不同干燥方法的优劣顺序为微波干燥＞远红外干燥＞烘干＞晒干≈阴干。

知母；干燥加工；菝葜皂苷元；知母皂苷AⅢ；芒果苷；新芒果苷

知母为百合科知母属多年生草本植物知母Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎[1]，具有清热泻火、生津润燥的功效，主要用于外感热病，高热烦渴，肺热燥咳，骨蒸潮热，内热消渴，肠燥便秘等症。为探讨干燥加工方法对知母主要化学成分的影响，本研究考察了采用不同干燥加工方法时知母的化学成分含量，为实际生产中选择知母合理的干燥加工方法提供依据。

1 仪器与材料

ESA高效液相色谱仪，ESA蒸发光散射检测器（美国 ESA）；Agilent1100高效液相色谱仪（美国安捷伦），配置：高效液相色谱泵、紫外检测器；KQ-500DE型数控超声波清洗机 （昆山市超声仪器有限公司）；HH-6型恒温水浴锅（江苏国华电器有限公司）；DF205电热鼓风干燥箱 （北京京通仪器厂），70-1型远红外干燥箱 （上海申光仪器仪表有限公司），MG-5021TW1型微波炉（LG）。

菝葜皂苷元对照品购自原中国药品生物制品检定所（批号：110744-200306，含量测定用），知母皂苷AⅢ对照品购自天津中新药业中药现代化技术工程中心（批号：0701119，含量测定用）。新芒果苷对照品购自天津中新药业中药现代化技术工程中心（批号：ZWY0801-4-2，含量测定用），芒果苷对照品购自原中国药品生物制品检定所 （批号：111607-200301，含量测定用）。水为娃哈哈纯净水，甲醇、乙腈为色谱纯（FISHER），其余试剂均为分析纯（北京化工厂）。

知母样品采自易县西陵知母规范化生产基地同一种植地块，根茎用微湿润的毛刷仔细洗净泥土后切片，切片厚度为3～5 mm。

2 方法与结果

2.1 干燥加工方法[2]

阴凉通风处晾干表面水分，按以下方法分别进行干燥加工，每种方法平行重复3次，每次200 g，分别记录干燥所用时间。

2.1.1 晒干 取药材切片直接置日光下晾晒至干，白天每隔3 h翻动1次。

2.1.2 阴干 取药材切片置室内阴凉通风处晾干，白天每隔3 h翻动1次。

2.1.3 烘干 将药材切片平铺于搪瓷盘中，置电热鼓风干燥箱中烘干，烘干温度分别为80℃、60℃、40℃。

2.1.4 远红外干燥 将药材切片平铺于搪瓷盘中，置远红外干燥箱中烘干。

2.1.5 微波干燥 将药材切片均匀码放在微波炉专用托盘周围，低温3 min后，温火20 min干燥。所有样品均干燥至能达到质硬而脆，易掰断，断面黄白色、无焦斑的标准为止。各干燥加工方法干燥时间见表1。

表1 各种干燥方法所用干燥时间

2.2 各成分含量测定方法

2.2.1 菝葜皂苷元测定方法[3-6]

2.2.1.1 色谱条件 KromasilC18柱（250mm×4.6mm，5 μm，大连依利特）。流动相∶甲醇，流速1.0 mL/min。柱温为室温，蒸发光散射检测器漂移管温度为50℃，蒸发温度为70℃，以氮气为雾化气，压力为137.9 kPa，在此条件下，菝葜皂苷元保留时间为6.9 min。

2.2.1.2 对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的菝葜皂苷元对照品适量，置容量瓶中，甲醇溶解定容，配制成浓度为0.267 2 mg/mL的对照品溶液，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。

2.2.1.3 供试品溶液的制备 取药材粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置25 mL容量瓶中，加入95%乙醇浸泡过夜。超声波振荡40 min，取出放凉后乙醇定容，过滤，取续滤液10 mL置圆底烧瓶中，蒸干乙醇，加入浓盐酸 1.5 mL，水 10 mL，水蒸气回流水解2 h。水解液放凉后，滴加40%氢氧化钠溶液至由黄色突变为橙红色。用三氯甲烷30 mL萃取两次，合并萃取液，回三氯甲烷仿至干。残渣用甲醇溶解，转移至10 mL容量瓶中，甲醇定容后用0.45 μm针头过滤器过滤，即得。

2.2.1.4 方法学考察 经实验考察，线性、精密度、稳定性、重复性及回收率均符合要求。

2.2.2 知母皂苷AⅢ测定方法[7]

2.2.2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，大连依利特）。流动相∶甲醇-水（85∶15），流速1.0 mL/min。柱温为室温，检测器漂移管温度为50℃，蒸发温度为70℃，蒸发光散射检测器以氮气为雾化气，气体压力为137.9 kPa，在此条件下，知母皂苷AⅢ的保留时间为11.6 min。

2.2.2.2 对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的知母皂苷AⅢ 对照品适量，置容量瓶中，甲醇溶解定容，配制成浓度为0.149 mg/mL的对照品溶液，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。

2.2.2.3 供试品溶液的制备 取药材粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置25 mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，浸泡过夜。超声波振荡 40 min，放凉后用80%乙醇定容。摇匀静置后，取上清液经0.45 μm针头过滤器过滤，即得。

2.2.2.4 方法学考察 经实验考察，线性、精密度、稳定性、重复性及回收率均符合要求。

2.2.3 新芒果苷和芒果苷测定方法[8-10]

2.2.3.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Hypersil C18柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm，大连依利特）。流动相：乙腈-0.2%冰醋酸（10∶90），流速1 mL/min。柱温为室温。检测波长：258 nm。在此条件下，新芒果苷保留时间为5.4 min，芒果苷保留时间为11.6 min。

2.2.3.2 对照品溶液的配置 精密称取干燥至恒重的新芒果苷对照品和芒果苷对照品适量，加30%甲醇溶解，转移至100 mL容量瓶中定容，配制成新芒果苷和芒果苷浓度分别为0.104 7 mg/mL和0.053 5 mg/mL对照品溶液，用0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。

2.2.3.3 供试品溶液的制备 取药材粉末（过三号筛）约0.2 g，精密称定，置25 mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，浸泡过夜。超声处理40 min，取出放凉后，80%乙醇定容。过滤，取上清液经0.45 μm针头过滤器过滤，即得。

2.2.3.4 方法学考察 经实验考察，线性、精密度、稳定性、重复性及回收率均符合要求。

2.3 不同干燥加工方法知母各成分含量测定结果

将干燥加工后的药材切片粉碎，过三号筛作为测定用样品，对样品进行化学成分含量测定，3次测定结果取平均值，结果见表2。

表2 各干燥方法知母有效成分含量测定（±s，n=3）（mg/g）

表2 各干燥方法知母有效成分含量测定（±s，n=3）（mg/g）

类别 菝葜皂苷元 知母皂苷AⅢ 新芒果苷 芒果苷晒干 8.33±1.01 2.22±0.28 13.08±0.76 4.47±0.44阴干 8.92±0.23 2.00±0.17 13.04±0.52 4.64±0.07 80℃烘干 11.15±0.55 2.73±0.14 10.79±0.21 7.27±0.32 60℃烘干 10.15±0.27 2.30±0.19 12.13±0.32 5.36±1.14 40℃烘干 10.03±0.44 2.42±0.09 10.88±0.58 6.08±0.10远红外干燥 11.13±0.77 2.78±0.25 10.73±0.44 8.98±0.35微波干燥 10.65±0.48 2.34±0.15 12.06±0.33 9.98±0.26

3 讨论

仪器快速干燥方法加工的知母菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ、芒果苷含量均高于传统晒干、阴干方法干燥的知母，且3种成分在各干燥方法中的变化规律相近。菝葜皂苷元、芒果苷为80℃烘干、远红外干燥、微波干燥含量最高，其次为60℃烘干和40℃烘干，晒干和阴干含量最低；知母皂苷AⅢ为80℃烘干、远红外干燥含量最高，其次为60℃烘干、40℃烘干和微波干燥，晒干和阴干含量最低。新芒果苷含量在各干燥方法中的变化规律与芒果苷基本相反，晒干和阴干含量最高，经仪器干燥加工后含量降低。根据分子式推断，可能是由于新芒果苷上的糖苷基对热不稳定，加热干燥过程中容易断裂转化为芒果苷。整体上可以在不同方法之间比较二者总量：晒干、阴干、80℃、60℃、40℃烘干条件下新芒果苷、芒果苷含量之和相差甚微，远红外干燥和微波干燥方法含量之和有所上升。总体上，使用人工仪器快速干燥能起到杀酶保苷的作用，能有效防止知母皂苷类、黄酮苷类等成分的流失，从而最大限度地保证了知母皂苷类和黄酮苷类的含量。从有效成分保存方面考虑，不同干燥方法的优劣顺序为微波干燥＞远红外干燥＞烘干＞晒干≈阴干。

从干燥时间上进行分析：阴干和晒干用时较长，且这两种干燥方法容易受天气变化影响；烘干时间随温度高低而不同，为数小时，80℃烘干虽然用时较短且有效成分含量较高，但实际操作时易产生焦斑，权衡有效成分保留情况和用时长短，以60℃为宜；远红外干燥时间较短；微波干燥知母用时最短，这跟微波加热时知母内部水分快速透出有关，但具体操作时对药材饮片形状、厚度以及时间、温度等技术控制比较严格[11]。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010年版）一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：197.

[2]李晓君.对加强中药材质量控制的探讨[J].中国执业药师，2008，5（5）：21-22.

[3]陈千良，王文全，马长华，等.HPLC-ELSD内标法测定知母药材中菝葜皂苷元含量[J].药物分析杂志，2008，28（3）：350-353.

[4]彭全材，胡继伟，杨占南，等.HPLC测定贵州产知母药材中菝葜皂苷元的含量[J].贵州师范大学学报（自然科学版），2007，25（3）：98-101.

[5]李敏，费曜，王琦，等.天冬中菝葜皂苷元含量测定方法的探讨[J].现代中药研究与实践，2004，18（4）：34-37.

[6]马长华，钱捷，杨翓.知母中菝葜皂甙元含量测定[J].中成药，2000，22（11）：804-806.

[7]侯浣波，周慧，余萍，等.HPLC法测定麦冬中沿阶草酮甲的含量[J].中国执业药师，2011，8（8）：28-29.

[8]陈千良，王文全，马长华，等.西陵知母中芒果苷的含量动态研究[J].中国中药杂志，2007，32（10）：971-972.

[9]黄海滨，戴航，李学坚，等.RP-HPLC法测定不同产地扁桃叶中芒果苷的含量[J].广西中医药，2004，27（2）：51-52.

[10]黄海滨，李学坚，梁秋云.RP-HPLC法测定芒果叶中芒果苷的含量[J].中国中药杂志，2003，28（9）：839-841.

[11]孙怀远.微波干燥与微波灭菌技术在中药生产中的应用[J].中成药，2004，26（8）：667-668.

The Influence of Different Drying Techniques for the Contents of Effective Ingredients in Rhizoma Anemarrhenae

Guo Xiaoye1，Yang Dongsheng2，Ma Changhua2，Wang Wenquan2，Huang Jianmei1，Yin Yushan3（1 Pharmacy Department of Beijing Xuanwu TCM Hospital，Beijing 100050，China;2 Traditional Chinese Medicine College of Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102;3 Taihang Plant Development Co.，Ltd.of Yi County，Hebei Baoding 074200）

Objective:To study the influence of different dry techniques for the contents of effective ingredients in rhizoma anemarrhenae.Methods:Fresh rhizoma anemarrhenae was dried with different techniques，such as drying in the sun，drying in the shade，drying in the oven，far-infrared drying and microwave drying，and the contents of the effective ingredients such as sarsasapogenin，anemasaponin AⅢ，neomangiferin and mangiferin were determined by the validated procedure of HPLC.In this study，HPLC-ELSD and two-points external standard methods were employed for the content determination of sarsasapongenin and anemasaponin AⅢ，and HPLC-UV and external standard methods used for the content determination of mangiferin and neomangiferin.Results:Compared with other drying techniques such as drying in the sun or in the shade，higher contents of sarsasapogenin，anemasaponin AⅢand mangiferin were obtained when the samples processed by drying in the oven，far-infrared drying or microwave drying，while the content of neomangiferin was lower.Conclusion:For the sake of retaining effective ingredients and taking into consideration of the advantages of different drying techniques，microwave drying，far-infrared drying and drying in the oven can be used preferably other than drying in the sun or in the shade.

Rhizoma Anemarrhenae；Drying Techniques；Sarsasapogenin；Anemasaponin AⅢ；Neomangiferin；Mangiferin

10.3969/j.issn.1672-5433.2012.10.004

2012-03-11）

国家科技支撑计划子课题（2006BAI06A15-5）

郭晓晔，女，硕士，中药师。研究方向：中药分析。E-mail：guoxiaoye@126.com

马长华，男，教授。研究方向：中药质量控制方法学研究。通讯作者E-mail：machanghua60@sina.com