徐 跃，宋敏国，杨仙玉，袁进强

（浙江农林大学 林业与生物技术学院，浙江 临安 311300）

半乳糖凝集素（galectins）是动物凝集素的一类，具有高度保守的糖识别结构域（carbohydrate recognition domain，CRD），能特异性识别并结合β-半乳糖苷[1]。目前，已从动物组织和细胞中分离到15个galectin家族的成员，在细胞核、细胞质、细胞表面、细胞基质和生物体液中都有发现[2]。galectin-3（gal-3）是该家族中唯一的嵌合型代表[1]，作为一个多功能蛋白，参与胚胎发育、细胞黏附和增殖、凋亡、mRNA剪切、细菌定植、调节免疫反应等[3-7]。该蛋白由3个不同的结构域组成：①12个氨基酸残基组成的N-端结构域，其中ser6磷酸化位点具有调节细胞靶向的作用；②富含甘氨酸（gly），酪氨酸（tyr）和脯氨酸（pro）串联重复序列的类胶原结构，作为基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）的底物；③140个氨基酸残基组成的CRD，包含凋亡基因Bcl-2家族同源序列BH1中的保守基序NWGR（asp-trp-gly-arg），该基序被认为是抑制凋亡活性的关键结构[6，8]。gal-3通过糖基识别系统与细胞表面受体多糖的结合和交联，从而介导信号转导[2]，在不同的生物过程中发挥作用。CRD区域包含与晚期糖基化终末产物（advancedglycation end products，AGEs）结合的位点，和全部的糖基结合位点，因此被认为是gal-3凝集功能的活性中心[2]。本实验室从中华大蟾蜍Bufo gargarizans皮肤中克隆到一个galectin-3基因（登陆号：AEX58672.1）[9]，并在后续实验中共获得了9个不同的galectin-3 cDNA克隆。本研究对其核苷酸序列以及推导蛋白质的氨基酸序列进行比对和分析，将有助于了解中华大蟾蜍对环境适应性的机制及gal-3蛋白的生物学功能。

1 材料与方法

1.1 试验动物

健康中华大蟾蜍采自浙江农林大学东湖校区。……