孔　毅，黄　海，赖伊丽，黄世龙，刘会敏

(中国药科大学生命科学与技术学院，江苏 南京 210009)

西仑吉肽(cilengitide，EMD- 121974)是德国化学家Kessler设计的含有RGD序列的环肽c[RGDf(N-Me)V]。该肽基于体内αvβ3整合素配体，通过综合运用环化、空间筛选和甲基化扫描而得,对αvβ3整合素具有高亲和性和选择性[1]。临床试验表明，该肽不仅能较好抑制黑色素瘤和胶质细胞瘤生长，而且与放射治疗配合能提高其他肿瘤如头颈鳞状细胞瘤的治愈率[2]，具有较好的市场前景和潜力。

除西仑吉肽发明者提供合成方法外[1]，目前尚未见西仑吉肽合成工艺细节研究的报道。本研究尝试对西仑吉肽合成方法进行优化，采用Fmoc固相合成与液相合成相结合的方法，以HBTU，PyBOP/HOBt为缩合剂，对合成方法特别是难以缩合的氨基酸的缩合方法进行了研究，对环化条件进行了探索。本方法合成效率高、原料易得、路线简单易行、具有一定的工业化应用前景。

图1　西仑吉肽分子结构式[1]Fig.1　The molecular structure of cilengitide[1]

1　材料与方法

1.1　仪器与设备

砂芯玻璃管，4号砂芯；循环水式真空泵，予华SHZ-DⅢ，河南巩义予华仪器有限公司；紫外-可见分光光度计，752，上海菁华科技仪器有限公司；半制备型高效液相色谱仪，BioLogic DuoFlow Pathfinder 20/80 System，美国Bio-RAD；高效液相色谱仪，岛津20A；冻干机，Labconco；质谱仪，岛津2010MS。

1.2　材料与试剂

2-CTC树脂，载量为0.9 mmol/g；9-芴甲氧基羰基(Fmoc)-氨基酸[Fmoc-Arg(Mtr)-OH；Fmoc-Gly-OH；Fmoc-(Otbu-)Asp-OH；Fmoc-D-Phe-OH；Fmoc-(N-Me-)Val-OH]；苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)；六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)；1-羟基苯丙三氮唑(HOBT)；N, N-二异丙基乙胺(DIEA) ；乙二硫醇(EDT)；三异丙基硅烷(TIS)，均为上海吉尔生化公司产品。二氯甲烷(DCM)；无水甲醇；无水乙醇；……