袁碧和（重庆市垫江县人民医院输血科 408300）

随着医学科学的迅猛发展，输血已经成为一门涉及多个学科的新兴学科。输血作为一种特殊的治疗手段可挽救患者生命，而准确的血型鉴定及交叉配血方法对安全输血起着非常重要的作用。安全输血是输血工作中的重点，必须保证血型鉴定、交叉配血等输血相关检测百分之百正确，因为0.1%的误差可能就会危及受血者的健康，甚至是生命。随着科学技术的进步，卡式微柱凝胶方法（简称卡式法）已在全国各级医院中普遍运用，逐步取代了已使用百年传统式的血型血清学技术。相对于从前国内各级医院传统的血型鉴定及配血试验来说，卡式法结果准确、操作简单、时间短、试剂用量小、环境污染小［1－3］。2009年1月至2011年12月对本院需输血治疗的1 435例住院患者用卡式法进行血型鉴定及配血，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2009年1月至2011年12月本院需输血治疗的住院患者1 435例，其中男730例，女705例，年龄5～70岁，平均（25.49±13.65）岁。抽取肘静脉3mL，肝素抗凝，同时分别用卡式法和手工盐水法进行血型鉴定。

1.2 试剂 抗A、抗B血清购自上海血液生物医药有限责任公司，抗D单克隆血清由长春博德生物技术有限责任公司提供，ABO、RhD血型鉴定Cellbind微柱凝胶卡由荷兰皇家血液基金会有限公司提供。盐水购自天圣制药集团股份有限公司。操作及结果判定按使用说明书进行。

1.3 仪器 免疫微柱孵育器和血型血清学离心机由长沙英泰仪器有限公司提供。

1.4 方法

1.4.1 手工盐水法 按《全国临床检验操作规程》［4］规定，正向定型和反向定型用试管法进行。

1.4.2 卡式法 按荷兰皇家血液基金会有限公司Cellbind微柱凝胶卡血型鉴定操作手册进行：取微柱凝胶卡分别标明ABO／D正、反定型卡各1张，标记患者姓名、住院号和日期等，撕去卡上部的锡纸膜。在A、B、D孔内，各加入0.5%受检红细胞45μL，再分别加入20μL抗A、抗B、抗D血清。在A1、B孔内各加入45μL的0.5%A、B型红细胞悬液，再加入45μL受检血清。900r／min离心2min，1 480r／min离心3min，4 400r／min离心5min，取出观察结果。按微柱凝胶卡说明书提示标准判读结果，红细胞完全降至柱底者为阴性，完全或部分被阻挡于凝胶内者为阳性。

2 结 果

在1 435例送检血样中，微柱凝胶法一次性正确率正定型为100.0%，反定型为99.7%；手工盐水法一次性正确率正定型为99.3%，反定型为98.9%。两种方法血型鉴定正确率比较见表1。1 435例血样共检测RhD型12例，占0.83%。正反定型不相符者30例，将血液红细胞用生理盐水洗涤3次，再进行重复鉴定，有6例为红细胞浓度异常，10例血浆中含有纤维蛋白，5例为红细胞悬液不新鲜。其余9例正反定型不符者，进一步检测发现2例有抗IgG抗体（肿瘤），3例自身凝集（多发性骨髓瘤），2例有严重冷凝集（凝血功能障碍），2例红细胞被抗体致敏（自身免疫性溶血性贫血）。

表1 两种方法血型鉴定结果比较

续表1 两种方法血型鉴定结果比较

3 讨 论

随着医学的发展，安全输血日益受到人们的重视。目前，大多数医院在进行交叉配血试验时还在应用盐水法、酶法、聚凝胺法等传统方法，这些方法灵敏度较低，操作繁琐，需反复洗涤红细胞，自动化程度低，试验全过程不宜标准化，且影响因素多，不利于临床采取正确的诊治手段。卡式法是近年来被推荐使用的，是微柱凝胶技术与上述传统方法结合的产物，其既克服了传统方法的缺点，又具有灵敏度、准确性高等优点，为临床安全输血提供了很好的保障［5－6］。

本研究结果显示，正反定型不相符者30例，有6例为红细胞浓度异常，10例血浆中含有纤维蛋白，4例为红细胞悬液不新鲜。红细胞浓度或过高或离心不彻底，血清中含纤维蛋白、出现细胞“凝块”、细菌污染、反定型红细胞悬液不新鲜等，可能导致卡式法呈假阴性或假阳性［7］。因此，准确的红细胞浓度是卡式法正确操作的关键之一，文献报道2%为最佳红细胞浓度。

本研究结果表明，9例正反定型不符者，进一步检测发现2例有抗IgG抗体（肿瘤），3例自身凝集（多发性骨髓瘤），2例有严重冷凝集（凝血功能障碍），2例红细胞被抗体致敏（自身免疫性溶血性贫血），说明某些疾病可引起的自身凝集、冷凝集等，引起的抗原减弱，会影响卡式法鉴定结果，应予以重视。

本研究结果表明，卡式法鉴定血型，其正确率及反应强度均高于手工盐水法，且操作简便、快速、省时、省力，样本、试剂用量少，易于观察结果，并可以长时间保存血型鉴定样本（保存1周以上），有利于事后复查。同时，卡式法结果的判读易于标准化，最大限度减少了操作人员主观因素的影响。但由于卡式法成本略高于手工盐水法，因此，作者建议对门诊患者采用手工盐水法，而对住院患者则采用卡式法。

综上所述，卡式法是一种灵敏、安全的血型鉴定技术，对于提高血型检验质量有明显的促进作用，为临床安全输血提供了很好的保障，但由于成本略高于手工盐水法，可应用于住院患者血型鉴定。

［1］ 刘永霞.凝聚胺法与微柱凝胶法在临床配血中的应用比较［J］.现代中西医结合杂志，2012，21（3）：266－267.

［2］ 钟月华，罗铁军，黄华华，等.微柱凝胶法与凝聚胺法在交叉配血中的比较研究［J］.广西医科大学学报，2010，27（2）：296－297.

［3］ 赵小燕，王风玉，张英，等.两种方法在交叉配血中联合应用的效果评价［J］.中国医药指南，2009，7（14）：22－23.

［4］ 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京：东南大学出版社，2006：135.

［5］ 杨莹，谭雅玲，蒋永青.卡式配血在临床输血中的应用价值［J］.实验与检验医学，2011，29（3）：332.

［6］ 叶巧国，杨毓，何静，等.微柱凝胶卡式法在交叉配血及不规则抗体检测中的应用［J］.现代医院，2011，11（12）：59－61.

［7］ 王小平.微柱凝胶法应用于血型鉴定［J］.广州医药，2007，38（2）：60－61.