尹立影，张永忠

(东北农业大学理学院应用化学系，黑龙江 哈尔滨 150030)

红三叶(Trifoliumpratense)主要活性成分是红三叶异黄酮。红三叶中的异黄酮有近40多种[1]，主要的4种异黄酮分别为芒柄花黄素(Formononetin)、鸡豆黄素(Biochanin A)、染料木黄酮(Genistein)和黄豆苷元(Daidzein)[2-5]。前两种异黄酮含量相对较高，据报道红三叶中芒柄花黄素含量为9. 65 mg·g-1，鸡豆黄素含量为10.22 mg·g-1[3]。一般大豆(Glycinemax)中异黄酮含量0.50～1.70 mg·g-1[6]，红三叶中总异黄酮含量是其他豆科植物的10～30倍[7]，远高于大豆中大豆异黄酮含量[8]。红三叶中含有的异黄酮主要以糖苷的形式存在，采摘后由于酶解或水解反应主要以苷元形式存在[9]。红三叶异黄酮有消炎[10]、抗癌[11]、抗肿瘤[12]、调节人体激素平衡、改善骨质疏松、缓解妇女更年期综合症[12]、防治高胆固醇血症、抗氧化、清除自由基、预防紫外线[13]等作用。红三叶生长季节长，分布广泛，产量高，而且重复修剪能刺激红三叶中异黄酮含量的增加[7]。红三叶异黄酮可从叶、茎、花中提取，而大豆异黄酮只能从大豆种子中提取。种植大豆需要优质的耕地，而红三叶对土壤的要求不高，可以不占用粮食资源和优质土地，因此，红三叶是获取异黄酮重要的可再生生物资源。

亚临界水又称热液态水、高压热水或过热水[14]。亚临界水提取法(Subcritical Water Estraction，SWE)是近期国内外较流行的一种提取方法，具有节省提取时间、萃取效率高、对环境友好等优点。其在高热高压下处理且不使用酸、碱和催化剂，用水作为溶剂，没有有机溶剂残留，能保留提取物不被氧化、活性不被破坏[15]，因此，也被称为“绿色的处理法”。……