王方岩，戴雍月，方周溪，郝卯林，汪 洋

(1温州医学院病理生理学教研室，浙江温州325000;2温州医学院电镜室)

心肌缺血再灌注损伤(MIRI)常见于冠脉狭窄再通、心脏移植及冠脉搭桥术等外科手术过程中。对MIRI切实有效的保护方法至今仍为研究热点［1，2］。2011年，我们观察了三氧化二砷(As2O3)预处理对缺血再灌注损伤心肌的保护作用并探讨其机制。

1 材料和方法

1.1 实验材料 16只雄性SD大鼠(200～250 g)由温州医学院实验动物中心提供，均自由觅食、觅水;As2O3(哈尔滨伊达药业)，热休克蛋白27 (HSP27)多克隆抗体(武汉博士德)，即用型二步法试剂盒(北京中杉)。Langendorff装置(ML870B2，AD Instruments，Australia);Powerlab生物信号数据记录及分析系统(AD Instruments，Australia)。其余试剂均购于温州金山化学试剂仪器公司。

1.2 离体心脏缺血再灌注模型建立 以水合氯醛麻醉大鼠，肝素1 000 U/kg下腔静脉注射后迅速开胸取心，接Langendorff装置逆行灌注，采用恒压恒温灌流，灌注压力100 mmHg，灌注温度37℃。K-H液成分如下(单位:g/L):NaCl 6.896、KCl 0.350、KH2PO40.163、MgSO4·7H2O 0.296、NaHCO32.100、CaCl20.278、Glucose 1.982，pH 7.4。灌注液95%O2+5% CO2饱和。左心耳根部剪一小口，经左心房、房室瓣置入一连接压力传感器的乳胶球囊，与Powerlab生物信号数据记录及分析系统连接。调整球囊大小使左心室舒张末期压力(LVEDP)初始值为4～10 mm-Hg。将SD大鼠随机分为两组，每组8只。对照组灌注生理盐水，观察组实验前24 h腹腔注射As2O35 mg/kg。离体灌流时，先平衡20 min，再结扎冠状动脉左前降支缺血20 min后，松开复灌60 min。

1.3 观察项目

1.3.1 心功能及血流动力学指标 结扎前、缺血20 min、再灌注后30、60 min测定左心室压力收缩速率(LV+dP/dtmax)、左心室压力舒张速率(LV-dP/ dtmax)及左室发展压(LVDP)。

1.3.2 心肌梗死面积 复灌结束行常规伊文斯蓝、氯化三苯基四氯唑染色，并用Image J图像分析软件计算梗死区心肌面积占危险区面积(红色+灰白色)的百分比，得出梗死面积。……