朱智耀，高彦彬，邹大威，李步满，彭继升

糖尿病周围神经病变(Diabetic peripheral neuropathy DPN)是糖尿病常见的慢性并发症之一。其发病机制目前有多种学说，其中氧化应激引起的细胞凋亡在DPN的发生发展中发挥重要作用［1-3］。中药复方糖络宁治疗DPN的疗效在临床和实验研究中已得到初步证实［4-8］。本实验通过观察糖络宁对糖尿病大鼠背根神经节(DRG)细胞凋亡、半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响，进一步探讨其治疗DPN的作用机制，为更好地指导临床用药提供理论及实验依据。

1 材料

1.1 动物

SPF/VAF级雄性8周龄 SD大鼠，体重180g～220g，由北京维通利华实验动物公司提供。分笼饲养于北京中医药大学屏障环境动物实验室，环境温度控制在 20℃ ～25℃，相对湿度 40% ～70%，12/12h光照/黑暗循环。实验期间大鼠自由进水和进食。

1.2 药物

中药制剂糖络宁浸膏(主药为生黄芪、生地、牛膝、狗脊、丹参、川芎等)由北京中医药大学东方医院制剂中心提供，1ml浸膏含生药3g。

1.3 试剂

链脲佐菌素为美国 Sigma公司，兔抗大鼠Caspase-3多克隆抗体为美国 Cell Signaling Technology公司产品，原位细胞凋亡检测试剂盒为Roche公司产品(天津灏洋生物分装)，两步法免疫组化检测试剂盒、DAB显色试剂盒、Mayor，s苏木素均购自武汉博士德生物工程有限公司。

1.4 仪器

Olympus BX51显微镜、Olympus DP71摄像系统、稳豪血糖仪以及血糖试纸(美国LifeScan，Inc)。

2 方法

2.1 模型建立与分组处理

选用雄性SD大鼠适应性喂养1周，随机选择8只为正常对照(control)组，其余大鼠禁食不禁水12h后，将链脲佐菌素(STZ)溶入柠檬酸缓冲液(p H值=4.2～4.5)配制成1%的溶液，按60mg/kg给予一次性腹腔注射(control组大鼠注射等体积的柠檬酸缓冲液)。……