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基质中木聚糖酶活力测定方法的研究进展

2012-02-15王斐

天津化工 2012年5期

王斐

(青岛科技大学化工学院,山东 青岛 266042)

基质中木聚糖酶活力测定方法的研究进展

王斐

(青岛科技大学化工学院,山东 青岛 266042)

本文综述了基质中酶的提取方法及活力测定方法,如粘度法、生色底物法、琼脂糖扩散法、酶联吸附分析法和目前使用较多的还原糖法,如DNS法和最新涌现的用于微量测定的MBTH法。并就还原端基法介绍了其具体实验手段,如试管法、罐法、微孔板法。分析了方法中存在的问题并展望了该方法研究的发展趋势,如安培法和等温滴定量热法等。

木聚糖酶;测定;DNS法;MBTH法;微孔板法

在木聚糖酶的生产、销售、应用等流通链中,酶活力是质量控制的重要技术指标,而其测定方法则是决定结果是否准确的关键。根据木聚糖酶的来源及应用,所存在的基质包括微生物发酵液、饲料、食品添加剂、纸浆等。基质中酶活力受多种因素影响,如温度、pH、激活剂、抑制剂等[1]。另外,为提高酶制剂的稳定性,无活性载体常被用来将酶进行吸附固定,在检测时如何将酶提取出来也较为关键。其测定方法可按原理不同分为粘度法、琼脂糖扩散法、生色底物法、酶联吸附分析法和目前使用较多的还原糖法等。

1 基质中酶的提取方法的研究

酶的提取质量受提取溶剂、温度、提取时间的影响。同一种酶在不同的基质环境中抽提条件也不同。Cosson等[2]在测饲料中木聚糖酶活力时用pH4.8的柠檬酸钠-磷酸盐缓冲液在室温下搅拌提取0.5h,离心取上清作为酶提取液。高玲等……

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