郭延涛，沈绍传，贠军贤，姚克俭

浙江工业大学化学工程与材料学院 绿色合成技术国家重点实验室培育基地，浙江 杭州 310032

质粒DNA (pDNA) 可作为DNA载体用于基因治疗。相比于病毒载体来说，作为非病毒的pDNA安全方便[1]。近几年，基因治疗和 DNA疫苗技术的快速发展推动了对 pDNA载体的大量需求[2]，至2011年，全球开展的1 714项基因治疗临床医学试验中，有 18.7% (320项) 是以超螺旋质粒 DNA (scpDNA) 为外源基因运载载体[3]。获得pDNA一般要经过质粒转化、菌体培养扩增质粒、菌体裂解和分离纯化等几个步骤。从工程菌裂解液中分离 pDNA的实验室方法有些要用到动物源性酶，如煮沸法要用的溶菌酶和RNA酶，有些要用到有毒试剂，如碱裂解法要用苯酚和氯仿，溴化乙锭-氯化铯密度梯度离心法要用溴化乙锭和氯化铯，不适于药用pDNA的大规模制备。柱层析是生物分离中应用最广泛的方法之一，层析介质是其关键。针对蛋白质或酶等生物分子吸附分离而设计的常规商业化介质，孔径在纳米量级范围，适于分子量较小的目标物的扩散吸附。但是，对于pDNA等生物大分子物质，难以在这些介质内部扩散吸附，吸附容量和分离效率低。因此，研究适于pDNA等生物大分子的层析新技术和新介质，具有重要意义。近些年来，依据pDNA的各种特性，研究人员提出了不同的层析分离纯化方法，如离子交换色谱法[4-5]、疏水作用色谱法[6-7]、尺寸排阻色谱法[8]等。

超大孔连续床晶胶是一种新型的分离介质，内部有几微米至上百微米的相互连通的超大孔隙，可实现生物大分子的快速分离纯化[9-16]。……