李美航，仇杨，刘帅，董培越，宁小敏，李艳杰，杨公社，孙世铎

西北农林科技大学 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，陕西 杨凌 712100

MicroRNA是19~24个核苷酸长度的单链非编码RNA，它能够特异性识别其靶基因mRNA的 3¢UTR序列，以不完全互补配对方式与之结合，从而在转录后水平抑制靶基因表达。microRNA参与生长发育、细胞增殖、疾病发生等几乎所有的生物学过程，在动植物中发挥广泛的调节基因表达的作用[1]。研究表明一些microRNA 在脂肪细胞中发挥重要作用，如miR-27a/b、miR-138等是抑制成脂的microRNA，而Let-7、miR-335、miR-143、miR-122和miR-378等能够促进脂肪细胞分化[2-9]。

MiR-103是机体中重要的 microRNA，Graziano Martello等发现miR-103/107靶作用于microRNA成熟所必需的Dicer酶，miR-103/107表达变化对其他 microRNAs产生广泛的影响，其表达上调还能促进肿瘤的形成与迁移[10]；Mirko Trajkovski等证实抑制miR-103导致糖耐量和胰岛素敏感性升高[11]；Bernard等预测miR-103可能参与细胞内乙酰辅酶A和脂质的代谢[12]。但miR-103在猪前体脂肪细胞成脂分化中的作用尚不明确。另外，本实验室提取3日龄与180日龄荣昌猪背部脂肪组织 RNA进行 solexa测序分析。在129个表达量差异显著microRNA中，miR-103在大猪中是小猪的3.4倍，且在大猪小猪的脂肪组织中均有较高的表达丰度，预示着 miR-103在脂肪细胞的发育过程中存在作用。

本研究检测了 miR-103在猪原代前体脂肪细胞分化过程中的表达模式，构建了miR-103的腺病毒超表达载体，用其侵染猪原代前体脂肪细胞并进行诱导分化，使用无靶位点的乱序miRNA——miR-NTC (miR-nontargeting control)作为对照，采用Real-time PCR和Western blotting手段检测脂肪细胞成脂标记基因 PPARγ与 aP2的 mRNA及蛋白水平变化，进而明确 miR-103在猪前体脂肪细胞分化中的作用。……