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Red同源重组敲除nagE和manX对大肠杆菌发酵生产氨基葡萄糖的影响

2012-02-09陈欣刘龙李江华刘杰堵国成陈坚

生物工程学报 2012年3期
关键词:产量

陈欣,刘龙,李江华,刘杰,堵国成,陈坚

1 糖化学与生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122

2 江南大学生物工程学院,江苏 无锡 214122

3 江苏江山制药有限公司,江苏 靖江 214500

4 江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122

氨基葡萄糖 (Glucosamine,2-amino-2-deoxy-D-glucose,GlcN) 又称氨基葡糖或葡糖胺,是葡萄糖的一个羟基被氨基取代后的化合物[1-4],在保健食品和医药领域具有广泛应用,如能特异性地作用于关节软骨,有效治疗风湿性关节炎;可抑制白血病细胞K562的生长;可参与肝肾解毒,发挥抗炎、护肝的作用等[5-7]。在日本和美国,GlcN作为食品配料广泛应用。但令人遗憾的是,目前国内上市的GlcN产品还比较少,相关产品的开发空间和潜力巨大。GlcN的生产方法可分为3种:甲壳素水解法、生物转化法[8-9]和微生物发酵法[1-4]。甲壳素水解是目前生产GlcN的主要方法,但原料来源受限、环境污染严重、部分消费者服用后会过敏;生物转化法生产的酶的价格高、生产成本高,转化时间长,难于实现工业化生产[1-4,10-11];因此微生物发酵生产GlcN吸引了越来越多研究者的关注[12-14]。相对于水解法和生物转化法,微生物发酵法具有以下优点:1) 发酵时间较短,生产强度较高;2) 原料来源不受地域和季节限制,产品无鱼腥味;3) 对环境污染小;4) 产品来自微生物,消费者服用后不会出现过敏。但目前国内外关于 GlcN发酵生产的研究寥寥无几。

对大肠杆菌中 GlcN合成代谢途径的研究[1,4,15-16]表明:进入细胞内的葡萄糖在磷酸葡萄糖异构酶 (PGI) 的催化下转化成6-磷酸葡萄糖,后者在氨基葡萄糖合成酶 (GlmS) 催化下生成GlcN,氨基葡萄糖乙酰化酶 (Gna1) 催化 GlcN转化成乙酰氨基葡萄糖 (GlcNAc) (图1)。……

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