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鳜胰岛素样生长因子-ⅡcDNA基因的克隆与表达特征

2012-02-08刘俊赵金良张敏代威

大连海洋大学学报 2012年6期

刘俊,赵金良,张敏,代威

(上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海 201306)

鳜胰岛素样生长因子-ⅡcDNA基因的克隆与表达特征

刘俊,赵金良,张敏,代威

(上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海 201306)

为全面获得鳜Siniperca chuatsi GH-IGFs生长发育轴的调控因子特征,采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增 (RACE)技术成功克隆了肝组织胰岛素样生长因子-Ⅱ (IGF-Ⅱ)cDNA序列。结果表明:鳜IGF-Ⅱ cDNA全长为1 643 bp,包括5'端非翻译区103 bp、3'端非翻译区892 bp和开放阅读框648 bp,开放阅读框编码215个氨基酸;鳜IGF-Ⅱ前肽由信号肽、成熟肽和E肽3部分组成,其中信号肽为47个氨基酸,成熟肽为70个氨基酸,E肽为98个氨基酸;鳜IGF-Ⅱ氨基酸序列与其他脊椎动物的相似度为81%~98%,与鳜IGF-Ⅰ的相似度为62.5%。运用实时荧光定量PCR技术检测了鳜成鱼不同组织以及孵化后0~22 d仔稚鱼中IGF-ⅡmRNA的表达情况,结果表明:IGF-ⅡmRNA在鳜脑中表达量最高,在肌肉、心脏、胃、鳃、肾脏中表达量次之,在脾、前肠、后肠、性腺、肝脏中表达量较低;在孵化后早期发育阶段均检测到有IGF-ⅡmRNA表达,孵化当天 (0 d)表达量最高,之后表达量有所降低。本研究结果可为鳜IGF-Ⅱ对生长发育的调控作用研究提供科学依据。

鳜;胰岛素样生长因子-Ⅱ;基因表达

鱼类具有特殊的生长模式,即成年期后仍继续生长[1]。由于GH-IGFs轴是脊椎动物生长发育的主要内分泌调控轴[2-3],因此,鱼类成为脊椎动物GH-IGFs轴生长调控作用研究的重要模式动物。胰岛素样生长因子 (Insulin-like growth factors,IGFs)是一类在结构上与胰岛素原具有高度同源性的多肽,IGF系统包括2个配体(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ),2个受体 (IGF-Ⅰreceptor、IGF-Ⅱreceptor),6个结合蛋白 (IGF binding proteins,IGFBPs)[4]。其中,IGF-Ⅱ与胰岛素、IGF-Ⅰ有67~70个同源氨基酸,通过IGF系统介导的信号通路,参与调节动物生长、繁殖、细胞增殖与分化、抑制细胞凋亡等多种生理作用[5]。……

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