毕 玲，葛庚芝，赖雁平，于树云，司 进，李 彬，张贵生

(天津医科大学第二医院，天津300211)

铜绿假单胞菌(PAE)广泛分布于自然界及健康人的皮肤、肠道和呼吸道，当人体免疫力降低、严重创伤或进行创伤性医疗操作时容易引起内源性感染［1］，是下呼吸道感染的重要病原体［2］。氨基糖苷类药物为广谱抗生素，一直与β-内酰胺类合用作为治疗PAE感染的一线药物［3］。随着氨基糖苷类药物的长期使用，PAE对这类药物的耐药率明显升高。研究发现，其耐药机制主要是产生AMEs、16S rRNA甲基化酶和氨基糖苷类药物作用靶位16S rRNA基因突变，以产生AMEs为常见［4］。16S rRNA甲基化酶首次发现于产氨基糖苷的放线菌中，近年来在人类致病菌中亦相继报道了这一机制介导的高水平氨基糖苷类耐药［5］。为调查对氨基糖苷类耐药的PAE下呼吸道感染分离株中与耐药相关的氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因和16S rRNA甲基化酶基因(以下简称甲基化酶基因)的存在状况，2009～2010年，我们收集了从下呼吸道感染患者合格痰标本中分离的对临床常用氨基糖苷类药物耐药的52株PAE，检测了6种AMEs基因及6种甲基化酶基因，旨在探讨下呼吸道感染分离的PAE对氨基糖苷类药物的耐药机制。

1 材料与方法

1.1 材料 52株PAE分离自下呼吸道感染患者合格痰标本(天津医科大学第二医院32株，天津医科大学总医院20株)，经K-B法证实对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星及奈替米星中至少1种药物耐药，结果判读依照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)2008年版标准。半数抑菌浓度(MIC50)分别为1 024、128、16和＞1 024 mg/L，均以AMS-60全自动微生物分析仪鉴定到种。……