谷化平 尚培中 (中国人民解放军第251医院，河北 张家口 075000)

老年结直肠癌中尾型同源转录因子-2和半乳糖凝素-3蛋白表达及其意义

谷化平 尚培中 (中国人民解放军第251医院，河北 张家口 075000)

目的 探讨尾型同源转录因子-2(CDX-2)和半乳糖凝素3(Galectin-3，Gal-3)蛋白表达与老年大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学技术，检测90例老年大肠癌组织和30例正常黏膜组织中CDX-2和Gal-3蛋白表达情况。结果 90例老年大肠癌中CDX-2和Gal-3蛋白阳性表达率分别为65.6%(59/90)和60.0%(54/90)。老年大肠癌组织中CDX-2蛋白阳性表达率低于正常大肠组织(P＜0.05)，而Gal-3蛋白阳性表达率高于正常黏膜组织(P＜0.05)。CDX-2和Gal-3表达与老年大肠癌的分化程度、Dukes分期、浆膜浸润和淋巴结转移相关(P＜0.05)。结论 CDX-2和Gal-3蛋白表达与老年大肠癌浸润转移密切相关，联合检测其蛋白表达可作为判断老年大肠癌预后的客观指标。

大肠肿瘤;基因表达;抗原，CDX-2;抗原，Galectin-3;免疫组织化学;预后

老年大肠癌是消化道常见恶性肿瘤之一，其浸润转移是患者死亡的主要原因。大肠癌的形成和转移的发生是一个复杂的生物学过程，受多种基因或多因子共同调控。本文采用免疫组织化学方法，联合检测老年大肠癌组织中尾型同源转录因子-2(CDX-2)和半乳糖凝素3(Galectin-3，Gal-3)蛋白表达状况，旨在探讨这两种基因蛋白表达与老年大肠癌发生、发展和临床病理学特征的相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 取我院2006年1月至2010年1月手术切除、并经病理确诊的老年大肠腺癌90例(结肠癌50例，直肠癌40例)，男54例，女36例，年龄65～79岁，平均(66.89±5.48)岁。取同期患者远癌切缘处正常大肠黏膜组织(距癌灶＞4 cm)各30例作为对照观察。标本经40 g/L甲醛固定，石蜡包埋，4μm厚连续切片。

1.2 试剂 鼠抗人CDX-2、Gal-3单克隆抗体和LSAB试剂盒购自迈新生物技术公司(均为即用型)。

1.3 免疫组织化学染色 采用微波-链霉菌素-生物素(MWLSAB)免疫组织化学法和微波-金属盐抗原修复技术，即将切片常规脱蜡水化后，放入枸橼酸缓冲液(10 mmol/L，pH 6.0)内，用微波仪170W辐射5 min，冷却后水洗。其他操作流程同常规LSAB法，所不同者为三步抗原孵育和正常血清封闭用微波仪130W分别辐射5 min，保温2 min即可。实验用已知CDX-2和Gal-3阳性胃癌组织作阳性对照，用磷酸盐缓冲液代替一抗作为阴性对照。H2O2-DAB显色。

1.4 结果判断 CDX-2在细胞核、Gal-3在细胞质呈棕黄色染色者为阳性。根据染色强度及显色癌细胞比例将两种蛋白表达状况分为4级:未见棕黄色颗粒为阴性(-);阳性细胞数＜25%为弱阳性(+)，25% ～75%为阳性(++)，＞75%为强阳性(+++)。(+)以上为阳性结果。

1.5 统计学方法 采用配对资料χ2检验。

2 结果

2.1 CDX-2和Gal-3蛋白在老年大肠良、恶性病变中的表达免疫组织化学染色显示CDX-2和Gal-3蛋白阳性产物呈棕黄色或棕褐色。CDX-2蛋白阳性产物定位于细胞核，Gal-3蛋白阳性产物定位于细胞质(图1)。CDX-2蛋白在正常大肠黏膜组织中阳性表达率为93.3%(28/30)，在大肠癌组织中阳性表达率为65.6%(59/90)，差异显著(χ2=13.78，P ＜0.05);Gal-3 蛋白在正常大肠黏膜组织中阳性表达率为0%(0/30)，在大肠癌组织中阳性表达率为 60.0%(54/90)，差异显著(χ2=4.14，P＜0.05)。

2.2 CDX-2和Gal-3蛋白表达与老年大肠癌临床病理参数的关系 CDX-2和Gal-3蛋白阳性表达均与老年大肠癌肿瘤部位、肿瘤大小无关，而与老年大肠癌分化程度、Dukes分期、浆膜浸润和淋巴结转移相关(P＜0.05)(表1)。

2.3 CDX-2蛋白和Gal-3蛋白表达之间的相互关系 CDX-2阳性表达的59例老年大肠癌中，Gal-3表达阳性率为47.5%(28/59);在CDX-2阴性表达的31例老年大肠癌中，Gal-3表达阳性为 83.9%(26/31)，差异显著(χ2=8.02，P ＜0.05)。

表1 CDX-2和Gal-3蛋白阳性表达与老年大肠癌临床病理的关系〔n(%)〕

3 讨论

CDX-2基因最早由在果蝇的保守序列中发现，属于同源盒基因的caudal家族成员之一，是编码肠上皮细胞分化特异性核转录因子，结合肠上皮标记物的CDX反应元件，诱导和增强肠特异性基因的表达和活性，促进细胞分化、柱状形态和极化的形成。在胚胎期，CDX-2是诱导内胚层细胞向肠上皮转化的关键因素，并随着发育过的进展其表达趋向于肠上皮中，从人类受精卵发育的第6周开始，在肠上皮即可检出CDX-2;在成人，CDX-2是控制肠上皮增殖分化的重要因子，正常表达的组织主要是从十二指肠至肛管的整个肠道上皮细胞，亦可表达于胰腺上皮细胞、胃和食管的肠上皮分化细胞，而正常食管、胃黏膜和其他正常上皮均无表达〔1，2〕。有研究发现，CDX-2在卵巢黏液性腺癌、子宫内膜腺癌、甲状腺乳头状癌、膀胱腺癌和前列腺癌腺癌等也偶见表达，提示这些肿瘤具有向肠性分化的趋势〔3〕。近年来研究表明，CDX-2表达与大肠癌的发生和预后相关〔4〕。本研究结果表明CDX-2失活或缺失参与了老年大肠癌的发生，检测其表达异常，可作为老年大肠癌高危因素评价的参考指标之一。有研究发现，CDX-2杂合性缺失的小鼠在烷化剂的诱导下更易发生结肠肿瘤〔5〕;通过体外试验发现〔6〕，CDX-2 能抑制结直肠癌细胞的转移，可降低肿瘤的恶性程度;通过RNA干扰阻止CDX-2的表达即可使肿瘤细胞转移能力增强;这些结果表明CDX-2可能为一种抑癌基因，检测其表达对老年大肠癌的恶性程度判断和患者预后分析均具有重要参考价值。

Gal-3是Galectin(半乳凝素)家族的一员，能识别糖蛋白和糖脂的特异性低聚糖结构，广泛表达于正常组织和肿瘤组织中，参与多种生理和病理过程，它可通过刺激细胞增殖、阻止肿瘤细胞凋亡，以及促进新生血管形成、介导肿瘤细胞与细胞外基质相互黏附作用等，在肿瘤的发生发展和转移中起着重要作用〔7，8〕。近年来，通过在大肠癌中的研究发现，Gal-3在癌组织中的表达显著高于正常肠黏膜组织，并与肿瘤恶性程度和患者的生存期相关，因此Gal-3被认为是大肠癌原发肿瘤或转移肿瘤中可作为独立的预后指标〔9，10〕。本研究结果提示Gal-3蛋白高表达不仅与老年大肠上皮细胞的恶性转化密切相关，而且在肿瘤的临床进展、侵袭和转移过程中起到重要促进作用。Gal-3蛋白表达是老年大肠癌恶性进展的生物学标志，对预测肿瘤的转移潜能方面具有较大实用价值，是一个预测老年大肠癌患者预后的参考指标。

CDX-2和Gal-3在老年大肠癌的发生发展、临床进展和浸润转移的病理过程中并非独立事件，可能存在一个或多个中间环节将两者联系起来，共同参与了老年大肠癌的演化过程。因此，在临床病理活检中检测其基因蛋白表达，从不同侧面可以更确切、更全面地深入了解肿瘤的发生发展，反映出肿瘤的生物学行为，也为辅助诊断、预后判断和治疗提供更为可靠的依据。

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8 Teymoortash A，Pientka A，Schrader C，et al.Expression of Galectin-3 in adenoid cystic carcinoma of the head and neck and its relationship with distantmetastasis〔J〕.Cancer Res Clin Oncol，2006;132(1):51-6.

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R735.3

A

1005-9202(2012)16-3405-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.020

谷化平(1950-)，男，主任医师，主要从事肿瘤临床病理研究。

〔2011-05-18收稿 2011-09-16修回〕

(编辑 曹梦园)