梁佩红，江 斌，陈居铕，谭见容，杨小红

(暨南大学医学院附属广州市红十字会医院，广州市创伤外科研究所，广州 510220)

随着临床医学技术研究的飞速发展，医学实验中动物实验也越来越受到重视，尤其是大多数临床医学技术的新尝试，都先在动物身上做实验，然后再应用到临床上。在骨外科手术模型的动物实验方面，麻醉的好坏，直接影响实验的质量、结果和进程。传统的麻醉药戊巴比妥钠，在动物实验麻醉中，因深麻醉量与致死量很接近，实验动物存在个体差异，麻醉剂量难掌握，极易造成术中麻醉死亡；如何提高和改进麻醉效果，是动物实验手术的关键。经过参考相关文献［3-6，9］，摸索、实践、总结，我们逐步形成一套比传统的单纯用药效果更佳、且操作较为简便的麻醉方法，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物

健康新西兰兔80只，不分雌雄，体重2.5～3.5kg，均购于广东省医学实验动物中心【SCXK(粤) 2008-0002】，单笼饲养，自由进食。于2010年9月～2011年6月在广州市十字会医院动物实验中心实验【SYXK(粤)2006-0072】，随机分为3组，速眠新II组20只，戊巴比妥钠组30只，复合组(速眠新II戊巴比妥钠联合用药组)30只。

1.2 实验药品

1.2.1 麻醉药品 速眠新II注射液：长春军事医学科学院 军事兽医研究所，批号为：吉兽药试字(2004)005013；戊巴比妥钠粉剂：北京化学试剂公司，批号为020919。

1.2.2 呼吸兴奋剂的准备 麻醉前准备可拉明、洛贝林，在动物麻醉时，一旦发现麻醉过深，及时肌肉注射上述药品，以减少动物死亡。

1.3 实验方法

实验随机分为3组(A、B、C)，速眠新Ⅱ组(A组)：按速眠新Ⅱ0.3m l/kg，肌肉注射麻醉；戊巴比妥钠组(B组)：用戊巴比妥钠粉剂加生理盐水溶解，配成0.6%水溶液，过滤除菌，按35～40mg/kg静脉注射麻醉；复合组(C组)：先行0.6%戊巴比妥钠按35～40mg/kg静脉注射麻醉，待进入麻醉期后再行速眠新II按0.1mg/kg肌肉注射，表1。

表1 动物麻醉分组处理情况Tab.1 Group of anesthetic animal

1.4 观察指标

1.4.1 诱导期 从给药到进入麻醉的时间，此时呼吸平稳缓慢、肌肉开始松弛等。

1.4.2 麻醉期(麻醉持续时间) 进入麻醉后到苏醒的时间，此时呼吸平稳，睫毛反射、角膜反射迟钝或消失，肌张力显著降低，皮肤捏痛觉消失，趾蹼反射消失。

1.4.3 苏醒期 从开始苏醒到站立行走的时间，实验动物各种反射、反应开始恢复，肢体开始活动。

1.4.4 麻醉效果① 进入深麻醉时的稳定性：以兔睫毛、角膜反射减弱，肌张力松弛，兔耳皮肤夹捏反应消失为准，呼吸45±5次/m in，心率120±15次/分。② 麻醉死亡率：观察麻醉期及术后实验动物的存活例数。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 诱导期

A组诱导期时长为10.0±5(min)，B组与 C组诱导期时长均为4.0±2(min)。B组与 C组的诱导期时长明显短于A组，有显著差异(P＜0.05)，见表2。

2.2 麻醉效果

A组进入麻醉期的时间长，B组和 C组进入麻醉期较快，维持时间长，A组与B组、C组比较，维持时间有差异(P＜0.05)；复苏期A组、B组、C组之间差异不显著(P＞0.05)，表2。

表2 三种麻方法效果比较Tab.2 Comparation of three anesthetic methods during

2.3 麻醉期及术后的死亡率

A组与B组麻醉效果不够理想，表现为肌肉不够松弛，有痛觉，术中常需追加麻药，术中死亡率较高，C组的麻醉效果较好，死亡率低；术后 A组、B组、C组死亡率差异不显著(P＞0.05)，表3。

表3 麻醉期及术后的死亡率比较Tab.3 Comparation of anesthetic period and mortality rate after surgery

3 讨论

骨外科方面的动物实验，与其他的动物实验相比，麻醉的要求较高，特别是脊柱手术［7］。理想的骨科手术麻醉是①麻醉药物起效快，持续时间长；②镇静和镇痛作用强，整个手术过程中动物无躁动；③有良好的肌松作用；④麻醉苏醒快，药物不良反应轻，术后对实验动物影响小，死亡率低。实验过程中，好的麻醉方法，除了保证实验的质量外，还同时关注到实验动物的福利和伦理道德问题［8］。

首先，从实验动物的伦理道德来说，随着动物保护运动的深入，实验动物学的关注焦点逐渐从饲养管理和使用操作转向动物福利，而且现在国际学术刊物上发表涉及实验动物的论文，不但要求实验动物合格证，还需要提供所在单位“实验动物伦理委员会”的审查意见，因此，高质量的麻醉，完全符合人们日益重视动物伦理道德中的动物福利和提倡的“3R”(replace替代、reduction减少、refinement优化)原则。

其次，从实验质量来说，实验结果显示，速眠新II无论从诱导期、麻醉效果、维持时间，都差于B组和C组；速眠新II是由氟哌啶醇、保定丁、新保灵等药物制成的复合制剂。保定灵所含的二甲苯胺噻唑类似甲苯噻嗪，是 α2-受体激动剂，通过激活 α2-肾上腺素能受体起麻醉作用，镇静、肌松作用良好，镇痛作用较差，抑制呼吸和心脏传导系统，容易出现呼吸频率和心率下降；氟哌啶醇有较强的安定、镇痛、肌松作用，但抑制呼吸作用明显，术中须反复追加麻醉药，有产生快速耐受的可能，用药量大，难以掌握，容易导致术中动物死亡，也给术者带来麻烦。戊巴比妥钠虽然诱导期与维持时间都较理想，但由于具有拟 γ-氨基丁酸(GABA)的作用，与GABA受体结合，麻醉剂量的戊巴比妥钠能直接活化氯离子通道，使氯离子大量内流致突触后膜发生超极化，从而降低神经元的兴奋性，具有较强的镇静、镇痛、催眠作用，对呼吸有明显抑制。因为实验动物存在个体差异，麻醉药物的剂量不好控制，易导致 ① 术中苏醒，此时需追加麻药，这样会影响手术的连贯性，增加实验动物的痛刺激。② 术中麻醉意外死亡，因大量戊巴比妥钠极易引起呼吸抑制而致死，恰恰深麻醉的量与致死量很接近，故有术中死亡的危险。且本品在苏醒前伴有动作不协调、兴奋和挣扎现象，易造成术后外伤。C组则较理想，联合用药，麻醉时间延长，弥补了单一用药的不足，对于骨科手术，特别是脊柱手术，既可达到骨科实验手术的要求，也较为安全；两种麻醉药的先后使用，会产生协同作用，减少两种药物的单一使用量，速眠新II具有中枢神经性镇痛、镇静和肌肉松弛的作用，而合用后戊巴比妥钠剂量的减少，也有效地降低了它们的毒性作用和不良反应，诱导期缩短，麻醉维持时间延长，使药物浓度基本保持在安全范围内，降低了实验动物的死亡率［1、2］。

由于我们研究的方向是创伤外科，特别是骨科方面的相关研究，往往制作的动物模型都需要进行骨科手术，手术的部位比较深，且复杂，故实验动物的麻醉效果要求高，须做到肌肉松弛，肌张力少，无牵拉反应，无痛觉；同时，自主呼吸、心跳保持良好，麻醉平稳后，维持时间能使手术顺利完成。

综上所述，3组麻醉方法中，我们认为，复合组麻醉既能实现造模的要求，保证实验质量，也符合实验动物的伦理道德要求。麻醉效果好、安全，是骨科手术动物模型的较佳选择。

［1］杨智，康林，邓长青，等.引入速眠新II对戊巴比妥麻醉效果的改进［J］.湖南师范大学学报，2006，3(3)65-66.

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［3］杨培梁，王元占，朱玉峰，等.全身复合麻醉在动物实验中的应用研究［J］.中国比较医学杂志，2005，4(15)198-199.

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［5］李峰，段小红，吴军正.戊巴比妥钠麻醉口腔实验动物效果的分析［J］.贵阳中医学院学报，2001，29，59-60.

［6］钟伟帮，武兆忠，郭露萍，等.三种常用动物实验麻醉药对小白鼠麻醉效果比较分析［J］.2006(6)9633-634.

［7］孙煦化，李敏，王莉，等.几种麻醉剂在家兔脊柱手术中的效果比较［J］.吉林医学，2011，32(2)211-213.

［8］左志英.实验动物的中国福利［J］.科学与文化，2010，12，22-23.

［9］吴曙光，巫全胜，赵菊花，等.速眠新II与戊巴比妥钠对实验用白香猪麻醉效果的观察［J］.实验动物科学，2007，24(2)24-26.