大孔树脂分离纯化青钱柳总黄酮的工艺研究
2012-01-29郦红岩
郦红岩,陈 建,赵 雷
江苏吉贝尔药业有限公司,镇江 212009
青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljin.]广泛分布于江西、浙江、江苏、安徽、福建等地,是我国特有的速生树种。动物实验和临床研究表明,青钱柳有降血压、降血糖、降血脂、增强免疫力的功效,是一种值得开发的天然资源[1]。青钱柳中具有丰富的黄酮类化合物,如槲皮素、山奈酚、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖、山奈酚-4′-甲醚-7-O-β-D-甘露糖[2]、儿茶素、南酸枣乔松素-7-O-吡喃葡萄糖苷[3]等。研究表明,青钱柳黄酮是α-葡萄糖苷酶抑制剂,有很强的抑制活性,能显著降低糖尿病小鼠空腹血糖[4]。
目前有大量的文献报道证实,大孔树脂对于黄酮类物质的纯化精制具有良好的效果,已被成功用于多种中草药中黄酮类物质的分离纯化[5]。本研究采用水提、大孔树脂吸附、解吸来纯化青钱柳中总黄酮,为青钱柳的深度开发提供参考。
1 仪器、原料与试药
岛津UV-2550紫外分光光度仪;CP225D电子天平(德国赛多利斯)。
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号:100080-200707);HPD722、HPD100、D101、HPD400、HPD600、HPD427大孔树脂 (购自沧州宝恩吸附树脂材料科技有限公司)。试剂为分析醇;水为蒸馏水。
青钱柳购自福建龙岩地区,经江苏大学欧阳臻教授鉴定确认为青钱柳(样品标本存放于本公司)。
2 总黄酮测定
2.1 溶液制备
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品0.2 g,精密称定,置100 mL量瓶中,加95%乙醇70 mL,超声使溶解,加乙醇至刻度,摇匀,精密量取10 mL,置100 mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含无水芦丁0.2 g)。
2.1.2 供试品溶液的制备 精密量取洗脱液25 mL,置50 mL量瓶中,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,混匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加氢氧化钠试液10 mL,再加水至刻度,摇匀,放置15 min,过滤,在500 nm波长处测定吸光度。……
