刘丽萍 ，王 艳

（1.黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室，哈尔滨 150080；2.农业微生物技术教育部工程研究中心，黑龙江 哈尔滨 150500；3.黑龙江大学农业资源与环境学院，哈尔滨 150080；）

无融合生殖（apomixis）是指通过种子进行繁殖的特殊的无性繁殖方式，产生的子代基因型与亲本精确相同，因此能固定杂种优势，具有重要的应用前景。我们于1988年开始进行栽培甜菜（B.vulgaris）与白花甜菜种间杂交，成功获得了真实杂种，经多次回交，首次在世界上获得带有无融合生殖特性的栽培甜菜带有白花甜菜染色体的甜菜单体附加系系列，并利用显微切割技术（Microdissection）在南开大学生命科学学院已将白花甜菜染色体识别并分离，为进一步克隆无融合生殖基因提供优质材料［1－2]。

被子植物的雌配子体也称胚囊［3]。无融合生殖甜菜M14胚囊位于子房、胚珠多层细胞下的深处，甜菜是厚珠心（6～7层）胚珠［4]，这给研究工作带来很大的难度，致使研究手段受到了很大的限制。胚囊是双受精及胚和胚乳发育的主要场所，因此具有重要的研究价值。申业等［5]对甜菜胚囊形成与发育的研究早有报道，但其传统切片方法的制作过程相当繁冗，工作量较大，并且根据连续切片来建立立体概念也需要相当的耐心与经验。为了寻求简便而富于立体感的观察胚囊的方法，我们在研究观察甜菜胚囊压片法及子房透明术观察无融合生殖甜菜胚囊发育的基础上，直接分离胚珠，并对胚珠进行再次切割和分离，直……