陈 皓

(泰山医学院附属泰山医院，山东 泰安 271000)

原发性胆囊癌(primary gallbladder carcinoma PGC)因早期无特定的临床症状和体征，诊断非常困难，且术后易复发或转移，预后极差。因此，研究胆囊癌高侵袭、高转移等恶性生物学行为的发生机制，对获得早期诊断和提高胆囊癌的预后十分关键。本研究采用免疫组化法分别检测了hMLH1和hMSH2在胆囊癌中的表达，探讨两者的相关性及与胆囊癌临床病理因素及预后的关系。

1 材料和方法

1.1标本取自泰安市中心医院2003年～2010年收治的经手术根治切除并病理证实的50例胆囊癌的蜡块，且临床资料齐全。其中男26例，女24例；年龄33～74岁，平均年龄55.2岁；组织学分化: 高分化13例，中分化17例，低分化20例；病理类型 :乳头状腺癌27例，管状腺癌16例，粘液腺癌4例，鳞癌2例，印戒细胞癌1例；局部淋巴结转移:有36例，无14例；临床Nevin分期：Ⅰ期2例，II期9例，Ⅲ期12例，Ⅳ期19例，Ⅴ期8例，另取20例胆囊息肉、20例胆囊炎标本作为对照。

1.2试剂与方法 鼠抗人MLH1单抗及鼠抗人MSH2单抗、均购于北京中杉生物技术公司。 免疫组化SP试剂盒购于北京中杉生物技术公司。免疫组织化学法检测hMLH1和hMSH2肝门胆管癌及正常胆管细胞中的表达。

所有标本连续切片3张，厚度为4 μm，收至玻片，入58 ℃烤箱中烘干溶蜡1小时，然后进行免疫组织化学(SP法)染色，以北京中杉生物技术公司的阳性对照片作为阳性对照。

1.3结果判断 hMLH1主要表达以细胞核为主伴少许浆， hMSH2细胞核细胞浆均可表达，二者染色均为淡黄色-深棕黄色，以阳性细胞数>5%且染色强度高于背景者为阳性，阳性细胞数<5%且染色强度与背景无明显差异者为阴性。

1.4统计学分析 计数资料采用χ2检验，数据采用SPSS13.0软件进行统计分析，取a=0.05为显著性检验水准对资料进行分析。