花 慧，冯 磊，张小平，张莲芬，金 坚*

1江南大学医药学院分子药理研究室;2江南大学工业生物技术教育部重点实验室，无锡214122;3无锡卫生高等职业技术学校，无锡214028

合欢皮为较常用中药，中国药典(一部)2000年版规定，合欢皮为合欢的干燥茎皮，具有解郁安神、活血消肿的作用、用于心神不安、忧郁失眠、肺痈疮肿、跌扑伤痛等症［1］。研究表明，合欢皮中化学成分较多，陈四平［2］等利用HPLC制备技术，从合欢皮乙醇提取物的正丁醇萃取部位分离得到一系列结构复杂的三萜苷类化合物。Julibroside J8是从合欢皮分离得到一种含九个糖三萜皂甙，郑路［3］等人研究表明其体外具有抑BGC-823、Bel-7402、HeLa、PC-3MIE8、MDA-MB-435和HL-60细胞的活性，具有经caspase家族及Bcl家族共同调控诱导Hela细胞凋亡的作用，但它是否具有抑制人微血管内皮细胞的作用尚不清楚。本研究旨在探讨Julibroside J8对人微血管内皮细胞的生长抑制作用及其可能的机制。

1 材料

SV40病毒转染的人微血管内皮细胞(HMEC-1)传代株由法国国家卫生医学研究院U553研究所(INSERM U553)陆核教授馈赠;SRB(Sigma公司); MCDB-131细胞培养基(Gibco BRL公司);胰酶、小牛血清、L-谷氨酰胺(华美生物工程公司);DAPI染液、TUNEL试剂盒(凯基生物公司);Annexin-V/PI双标记试剂盒(BD PharMin-gen公司)。

合欢皮购自江苏省无锡市山禾药业股份有限公司，由南京中医药大学陈建伟教授鉴定为 Albizia julibrissin Durazz.的干燥树皮。

2 方法

2.1 细胞培养

将HMEC-1用含1 mmol/L谷氨酰胺、1 mg/L氢化可的松、10 μg/L EGF和150 mL/L小牛血清的MCDB-131培养液，于37℃，50 mL/L CO2培养箱中传代培养。

2.2 合欢皂甙Julibroside J8的制备

将1 kg合欢皮分别用8 L、7 L 75%乙醇，100℃回流提取两次，每次2 h，过滤，去渣。合并滤液，减压回收乙醇，得浸……