李 静 胡志东 田 彬 徐海茹 李 金

AmpC酶又称诱导酶，属于Bush分类中的Ⅰ类酶及分子生物学中的C类酶[1]。AmpC酶多数由染色体介导，部分呈诱导型表达。近年也陆续发现了质粒介导AmpC酶，其耐药基因可在同种或不同种属细菌间广泛传播，使细菌耐药日趋复杂，给临床治疗提出了严峻的挑战，迫切需要临床实验室能快速而准确地检测产AmpC酶的细菌。目前临床实验室标准化委员会（CLSI）尚未确定检测的标准方法，本研究以三维试验和聚合酶链反应（PCR）为参照，与3-氨基苯硼酸（APB）双纸片协同法进行比较，以评价APB双纸片协同法用于临床实验室检测临床分离的大肠埃希菌的可靠性。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 收集2010年1月—10月天津医科大学总医院住院患者各类送检标本（包括痰、尿、血、胸水、腹水等），经常规方法进行细菌分离，用Compact全自动微生物分析仪鉴定，选取无重复分离大肠埃希菌44株进行研究。大肠埃希菌ATCC 25922、铜绿假单胞菌ATCC 27853、肺炎克雷伯菌ATCC 700603购自卫生部临检中心。阴沟肠杆菌O29M（染色体介导，AmpC酶持续高产株）、ACT-1质粒介导AmpC酶大肠埃希菌由北京协和医院检验科惠赠。

1.2 主要试剂与仪器 头孢西丁（FOX，30 μg）、头孢他啶（CAZ，30 μg）、头孢噻肟（CTX，30 μg）购自北京天坛药物生物技术开发公司，水解酪蛋白（MH）琼脂粉购自上海伊华医学科技有限公司，APB干粉购自Sigma公司。DNA Marker、PCR扩增试剂购于北京全式金生物技术有限公司，VITEK-2 compact全自动微生物系统及鉴定卡、药敏试验卡购自法国生物梅里埃公司，9700型DNA扩增仪为美国Perkin Elmer公司产品，Gel Doc 2000凝胶成像系统仪为美国Bio-Rad公司产品，水平电泳仪购自北京六一仪器厂。……