熊 亮 陈旭海 李玉榕 杜 民*

1(福州大学电气工程与自动化学院，福州 350108)

2(福建省医疗器械和医药技术重点实验室，福州 350002)

引言

聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，PCR)是体外酶促合成特异 DNA片段的一种方法，由高温变性(90～96℃)、低温退火(25～65℃)及适温延伸(70～75℃)三步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以按几何级数倍增。链式反应的关键是三温循环的控制，要求温度变化快、精度高、温度均匀性与恒温性好［1］。

电化学实时定量PCR，是一种采用电化学分析法对PCR反应中特定DNA序列进行检测的一种非光学实时定量PCR技术。该技术克服了目前应用广泛的荧光实时定量PCR技术的缺点，如光学仪器复杂、体积大、不利于小型化，通道数受光学装置限制，需考虑仪器严格的蔽光性及荧光基团的特异性;同时检测过程简单，只需在PCR混合物中添加少量易于处理和储存的氧化还原催化剂，就可以用电化学分析技术实现对较长DNA片段的检测，且特异性强。此外，除具有实时PCR技术测量范围宽、定量准确、精度高和速度快的优点外，还具有可在扩增过程中进行实时定量检测的特点(发生在电极表面)，是一种成本更低、更可靠、更易于小型化的非光学实时定量检测技术［2］。小型化已日渐成为一种趋势，将生物芯片应用于实时定量PCR技术，能够进一步缩小仪器尺寸。PCR芯片作为生物芯片的重要分支，是当今生物芯片研究的热点之一［3］。相对于传统的 PCR扩增单元，利用 PCR芯片来实现DNA扩增，热容量小，变温迅速，试剂消耗量大大减少，设备体积小，有利于便携式PCR的研制［4－5］。……