许 华， 何 清， 邓淑琴, 查庆兵

( 暨南大学1药学院，2附属第一医院胎儿医学科，广东 广州 510632)

Sox-2基因表达的变化在小鼠EST模型药物胚胎毒性评价中的应用*

许 华1△， 何 清1， 邓淑琴1, 查庆兵2

( 暨南大学1药学院，2附属第一医院胎儿医学科，广东 广州 510632)

目的： 建立小鼠胚胎干细胞实验 (EST) 模型，验证该模型检测胚胎毒性的有效性，探讨未分化基因Sox-2表达水平的变化对药物胚胎毒性评价的作用。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ES)，通过形态学观察、核型分析和碱性磷酸酶(AKP)染色等方法鉴定ES；MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、苯妥英钠(DPH)和青霉素G(penicillin G)对ES的毒性作用，RT-PCR半定量分析法检测3种药物对未分化基因Sox-2表达的影响。结果成功建立EST 模型。5-FU、DPH和penicillin G细胞毒性检测结果表明，其胚胎毒性依次为强、弱和无，与临床药物毒性相一致。Sox-2基因表达结果显示，随药物浓度增高及毒性增加，Sox-2基因表达量逐渐高于阴性对照组，但均低于未分化ES细胞。结论研究结果显示，Sox-2基因的表达水平与药物毒性密切相关，可用于初步评价EST模型中药物的胚胎毒性。

模型,小鼠胚胎干细胞； 胚胎毒性； 有效性; 基因,Sox-2

自从1981年Martin、Evans等成功地分离培养出未分化小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞以来，国内外学者已相继建立了大鼠、小鼠、猪、灵长类等多种动物的ES细胞系。但迄今，只有在小鼠、猴、人类中建立的ES 细胞系可以在体外长期增殖，且能维持其未分化状态[1]，其中又以小鼠胚胎干细胞体外分离培养较为简单易行而被广为用之。现有的胚胎干细胞实验模型(embryonic stem cell test，EST)大多通过检测待测物的细胞毒性及其对分化的抑制作用来确定其发育毒性[1,2]。……