一株犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析

杨龙峰①李英杰①艾萍萍①肖胜南①韩 柳②焦万亮①王建芬①张延光①刘月焕③*（①北京市延庆县农业局 102100 ②北京诚安动物医院 ③北京市农林科学院畜牧兽医研究所）

采集病犬的粪便，经处理后接种狗肾传代细胞系(MDCK)，培养96h无任何细胞病变，盲传到第3代时细胞系出现明显的细胞脱落，核圆缩，形成CPE (cytopathic effect)。继续传代到第7代。第1、2代的细胞培养物不能凝集猪的红细胞，第3代以后的细胞培养物可以凝集猪的红细胞。采用PCR技术，在各代次的培养物中均能扩增得到特异性的DNA片断，经序列测定后鉴定为犬细小病毒，定名为BJY06。为进一步研究该分离株的遗传演化情况，扩增得到了VP2基因的全序列。经序列测定，用DANStar软件分析表明BJY06毒株为CPV-2a亚型，所得到的VP2基因全长1755bp，含有完整的阅读框架，编码584个氨基酸。与其它亚型的毒株相比较核苷酸的同源性为98.3%~99.6%。氨基酸同源性为97.1%~100%。

犬细小病毒 病毒分离 鉴定 PCR VP2 序列分析

1978年，犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)同时从加拿大(Thomson等)、澳大利亚(Kelly)患肠炎的病犬中分离获得[1]。CPV可引起犬的出血性肠胃炎和心肌炎，并使白细胞大量减少，在幼犬中的发病率和死亡率都很高，症状与猫泛白细胞减少症相似。本病虽出现的时间不长，但目前已扩散到世界各地，几乎所有养犬的地方都有本病的存在[2]。1982年10月，我国报道在暴发传染性出血性腹泻的病犬的粪便提取物中发现细小病毒，随后，在我国各地陆续有本病发生的报道。

本试验从临床发病犬的粪便中分离到一株犬细小病毒，定名为BJY2006。……