北京市朝阳区药品检验所（100028）张艳霞

中国食品药品检定研究院（100050）孙磊

《中国药典》2010年版二部已经收载紫杉醇原料药及制剂的HPLC有关物质检查法[1][2]。由于药典和相关文献[3][4]的色谱条件梯度变化较剧烈，造成紫杉醇主峰流出后的色谱图基线波动较大，影响其后杂质峰的检出和定量，因此笔者优化了色谱条件，并进行了方法学验证，分析时间稍延长，但提供了更好的分离和识别效果。

1 仪器与试药

Waters2695高效液相色谱仪（2487紫外检测器，Epower2工作站），岛津2010a高效液相色谱仪（紫外检测器，CLASSVP工作站），紫杉醇、三杉尖宁碱（杂质Ⅰ）和7-表-10-去乙酰基紫杉醇（杂质Ⅱ）对照品均为USP reference standard，乙腈（色谱纯，Fisher），实验用水为Milli-Q系统制备，紫杉醇注射液。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱为Alltech C18 (250 m m×4.6 m m×5 μm)；检测波长227nm；柱温35℃；流速1.2ml·min-1。乙腈为流动相A，水为流动相B，梯度洗脱程序如下：

2.2 系统适用性试验 取紫杉醇、杂质Ⅰ和杂质Ⅱ对照品适量，用乙腈溶解并稀释制成每1ml含紫杉醇1.2mg、杂质Ⅰ和杂质Ⅱ各6μg的溶液作为系统适用性溶液。取该溶液连续进样6次，进样量15μl，理论板数按紫杉醇峰计应不低于25000，紫杉醇峰与杂质Ⅱ峰的分离度应不低于1.2，杂质Ⅱ峰面积的RSD应不大于2.0%。

2.3 溶液的制备

2.3.1 供试品溶液 精密量取注射液2ml置10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

附表 梯度洗脱程序

2.3.2 对照溶液 精密量取供试品溶液0.5ml置100ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3.3 赋形剂溶液 精密量取赋形剂2ml置10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4 有关物质测定

取系统适用性溶液、对照溶液、供试品溶……