北京四环科宝制药有限公司（100070） 曹相林 陈婧 魏墨玺

二甲双胍格列吡嗪片为治疗糖尿病的复方制剂，包括格列吡嗪和盐酸二甲双胍两种药物成分，两种药物成分的抗糖尿病作用机制相互补充，提高了对血糖的控制。其有关物质成分的测定方法在USP31[1]中有收载，本研究采用USP31中有关物质的测定方法检测二甲双胍格列吡嗪片时，发现杂质峰的分离度达不到要求，不能对杂质有效检出。因此本研究通过大量试验建立了一种能够有效检测复方制剂二甲双胍格列吡嗪片有关物质的高效液相色谱法，并申请了专利。

1 仪器与试药

Agilent 1100高效液相色谱仪（美国Agilent公司）；KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；CP225D型电子天平（德国赛多利斯公司）；4-(2-(5-甲基吡嗪-2-甲酰氨基)乙基)-苯磺酰胺对照品（批号：100282-200001）、双氰胺对照品（批号：100206-200302）、盐酸二甲双胍对照品（批号：100664-200602）、格列吡嗪对照品（批号：100281-200602）均购自中国药品生物制品鉴定所；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。

2 HPLC测定方法的建立与验证

2.1 色谱条件的建立 参考中国药典2010年版[2]中关于盐酸二甲双胍和格列吡嗪的有关物质色谱条件，初步确定采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，在同一色谱条件下检查二甲双胍格列吡嗪片的有关物质。进行了如下筛选：①磷酸二氢铵溶液（称取1.15g磷酸二氢铵和4.32g辛烷磺酸钠，加水至1000ml，用三乙胺调节pH值至7.0±0.05）-乙腈（80：20）为流动相。检测波长225nm。柱温：30℃。②将①项下流动相的比例调整为85：15。③以磷酸二氢铵溶液（0.575g磷酸二氢铵和4.32g辛烷磺酸钠，加水1000ml，用三乙胺调节pH值至7.0±0.05）-乙腈（83：17）为流动相。……