刘巧荣，包新奇，孙 明，王 芳，乔明明，李 佳，陈曦，秦亚嫚，陈西钊，2

(1.北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，北京 100085;2.中国动物疫病预防控制中心，北京 100085;3.江苏省动物疫病预防控制中心，南京 210036)

感染CDV的犬病料N、H、F基因的克隆与序列分析

刘巧荣1，包新奇3，孙 明1，王 芳1，乔明明1，李 佳1，陈曦1，秦亚嫚1，陈西钊1，2

(1.北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，北京 100085;2.中国动物疫病预防控制中心，北京 100085;3.江苏省动物疫病预防控制中心，南京 210036)

目的 了解病料中犬瘟热病毒(CDV)的变异情况，为犬瘟热的预防与治疗提供理论依据。方法 采用RT-PCR方法对犬病料中CDV的血凝素蛋白(H)、融合蛋白(F)和核衣壳蛋白(N)基因进行扩增，将扩增产物克隆到pGEM-T-easy载体中测序，并进行序列分析。结果 测定一株 CDV的 H、F和 N基因大小分别为1863 bp、1653 bp和2235 bp。同源性分析表明，未发现碱基的插入和缺失。该病毒的 H、F和 N基因分别与国内强毒株BJ080127株的H基因、GN株的F基因和HL株的N基因亲缘关系最近，氨基酸同源性分别为97.3%、97.7%和99.3%。与国外标准野毒株A75-17在核苷酸水平上同源性依次为94.4%、93.8%和97.2%，与疫苗株CDV3在核苷酸水平上同源性分别为88.5%、88.8%和93.9%。系统进化树表明该病毒与国内强毒株在同一谱系。糖基化分析显示，该病毒在F基因3～5位氨基酸处多出1个糖基化位点。结论 本研究从犬病料中成功克隆了犬瘟热病毒血凝素蛋白、融合蛋白和核衣壳蛋白，在F基因中新增了一个糖基化位点，为犬瘟热的遗传变异和流行学研究提供了分子生物学依据。

犬瘟热;血凝素蛋白基因;融合蛋白基因;核衣壳蛋白基因;序列分析S