宋安东，刘玉博，谢慧，王风芹，鲍晓明

1 河南农业大学生命科学学院，郑州 450002

2 山东大学微生物技术国家重点实验室，济南 250100

利用转座标签mTn-lacZ/leu2插入突变发酵性丝孢酵母2.1368-Leu−筛选高效产油突变株

宋安东1*，刘玉博1*，谢慧1，王风芹1，鲍晓明2

1 河南农业大学生命科学学院，郑州 450002

2 山东大学微生物技术国家重点实验室，济南 250100

为提高微生物油脂产率，降低其生产成本，以转座标签 mTn-lacZ/leu2插入突变发酵性丝孢酵母 2.1368-Leu−筛选高效产油突变株。利用LacZ显色反应、脂肪酸合成酶抑制剂Cerulenin和磷酸香草醛反应，最终在玉米秸秆糖化液中筛选出一株高效产油突变株2.1368-Leu−-7。结果表明其油脂含量为38.30%，比对照的29.33%高了8.97%，而其产油率为8.35%，比对照的6.92%提高了20.63%；在玉米秸秆糖化液中的糖利用率为77%，每100 g玉米秸秆可转化油脂8.32 g。可为未来生物柴油产业提供了廉价原料。

转座标签，磷酸香草醛反应，玉米秸秆糖化液，生物柴油

Abstract:To improve microbial lipid production, we inserted mTn-lacZ/leu2 into Trichosporon fermentans 2.1368-Leu−to obtain high lipid production mutants. By observing the LacZ chromogenic change, the positive reaction between Cerulenin (inhibitor of fatty acid synthase) and phosphate vanillin, a higher lipid-producing mutant 2.1368-Leu−-7 grown on corn-stalk hydrolysate was obtained. The lipid content of this mutant reached 38.30% (8.97% higher than that of the control) and the lipid production rate was 8.35% (20.63% higher than that of the control). The rate of sugar utilization was 77%, meaning that 100 g corn-stalk could be converted to 8.32 g lipid. The study provided an effective method for microbial lipid production by using cheap raw materials for biodiesel.

Keywords:Trichosporon fermentans, transposon tagging, corn stalk, biodiesel

生物柴油是典型的“绿色能源”，大力发展生物柴油对发展低碳经济、推进能源替代和减轻环境压力具有重要的战略意义[1-2]。当前利用动植物油脂生产生物柴油，原料成本偏高，并且稳定、充足的油脂原料供应体系尚未形成。而微生物油脂发酵周期短，不受场地、季节、气候变化等因素的影响；且产油微生物菌种资源丰富，能利用和转化各种农林废弃木质纤维素原材料，对农业大国具有特殊的意义。因此，利用微生物转化法获取油脂具有非常大的发展潜力[3-4]。

转座子标签技术是根据转座子随机插入突变的特性而发展起来的研究基因功能的新方法。……