银消颗粒对小鼠细胞因子影响的实验研究
2011-09-17刘拥军王璐张磊张健
刘拥军,王璐,张磊,张健
(1.黑龙江中医药大学附属第二医院,黑龙江 哈尔滨 150001;2.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040)
中药银消颗粒由大黄,苦参,黄芩,连翘,玄参等组成,在临床用于血热湿毒内蕴型银屑病的治疗。本课题通过研究其对银屑病小鼠模型TNF-α、IL-18和IL-10的影响,以免疫学为切入点,探讨中药银消颗粒防治银屑病的作用机制。
1实验材料
1.1 受试药物
银消颗粒(江阴天江药业有限公司,批号0806119);甲氨喋呤(上海医药有限公司信谊制药总厂,国药准字H31020644);生理盐水(哈尔滨三联药业有限公司,国药准字H23020612)。
1.2 实验动物
昆明种小白鼠,哈尔滨医科大学第三医院实验动物中心提供。
1.3 主要试剂
(TNF-α)肿瘤坏死因子-α ELISA试剂盒、白介素-10(IL-10)ELISA检测试剂盒(上海森雄科技实业有限公司);白介素-18(IL-18)ELISA检测试剂盒(美国R&D Systems进口分装)。
1.4 主要仪器
CO2培养箱(德国 Heraevs);酶标仪(BIORAD680中国香港);超净工作台(SM-CJ-IT苏州净化设备制造公司);紫外分光光度计(上海分析仪器厂)。
2实验方法[1]
2.1 动物分组
取昆明种小白鼠50只,雌雄各半,体质量18~22g,随机分为5组。生理盐水阴性对照组(NS),甲氨喋呤阳性对照组(MTX),银消颗粒分3个剂量组(低银、中银、高银),为治疗组。
2.2 动物的给药剂量
生理盐水阴性对照组为0.18g/kg(0.2ml/10g),甲氨喋呤阳性对照组为0.001g/kg(0.2ml/10g),银消颗粒各浓度组为 0.65g/kg、1.3g/kg、2.6g/kg(0.2ml/10g)。
2.3 动物造模
把各组动物分别称体质量,按给药剂量,NS组、MTX组和中药各组用灌饲器灌胃给药,均每天1次,连续用药14天。在用药期间,每间隔2天称量体质量1次,以调整给药量。
2.4 实验药物制备
用重蒸水1∶20稀释;底物工作液配制:使用前将OPD片放入底物稀释液中溶解,每片加液5ml;标准品液配制:使用前每管中加入蒸馏水200μl溶解后即可。……
