胡黄连苦苷Ⅰ大鼠在体肠吸收动力学研究
2011-09-17高宏伟匡海学阎雪莹
高宏伟,匡海学,阎雪莹
(1.黑龙江中医药大学附属第一医院,黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江中医药大学,黑龙江 哈尔滨 150040)
Picroliv为印度胡黄连活性成分胡黄连苦苷Ⅰ(picrosideⅠ,P-Ⅰ)、胡黄连苷制成的标准化制剂。对四氯化碳、硫代乙酰胺、单响尾蛇毒蛋白、土霉素及半乳糖胺等物质引起的肝损伤具有明显的保护作用,其中P-Ⅰ既可以对抗补体介导的肝细胞毒,又可对抗四氯化碳引导的肝细胞毒性[1]。
本实验采用大鼠在体肠吸收模型,建立了HPLC法测定肠循环液中P-Ⅰ的经时浓度,对其在大鼠各肠段的吸收动力学特征进行初步研究,为其提供生物药剂学依据。
1 试验材料
1.1 药品与试剂
胡黄连苦苷Ⅰ(含量97.96%,本实验室提取分离制得,经光谱及核磁共振图谱鉴定结构);乌拉坦(中国上海曹阳第二中学化工厂);苯酚红(天津市新精细化工开发中心);甲醇(色谱纯,美国Dikma公司);其余试剂均为分析纯。
1.2 实验仪器
LC-2010AHT型高效液相色谱仪(岛津公司);Class-VP 6.0工作站(岛津公司);Sartorius BT25S电子天平(德国Sartorius公司);HJ-6A型数显恒温磁力搅拌器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司);HL-3恒流泵(上海精科实业有限公司);pH计(梅特勒-托利多仪器上海有限公司);722型spectrum可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司)。
1.3 实验动物
清洁级Wistar大鼠,雌雄各半,体质量(200±20)g,由黑龙江中医药大学药物安全性评价中心提供(许可证号:SCXK(黑)2008004)。
2 实验方法
2.1 Krebs-Ringers肠循环灌流液的配制
NaCl(6.75g/L),KCl(0.31g/L),CaCl2(0.37g/L),NaH2PO4(0.22g/L),MgSO4·7H2O(0.29g/L),NaHCO3(1.83g/L),Glucose(2.2g/L),上述物质溶解在双蒸水中,调溶液pH值为7.4。
2.2 肠循环灌流液中酚红的含量测定
2.2.1 专属性考察
取肠循环灌流液 0.5mL,加 4.5mLNaOH(0.2mol/L),以不加酚红的灌流液为空白,使用756型可见分光光度计,分别于200nm~700nm波长范围内进行扫描,酚红在558nm处有最大吸收,P-Ⅰ的最大吸收波长为282nm,表明酚红与P-Ⅰ不产生干扰。……
