苏钜年， 赖永长，皮 婷， 薛小燕， 林炼峰， 罗焕敏，，3*

(1．暨南大学药学院神经药理研究室 广东 广州510632;2．暨南大学医学院药理学系 广东 广州510632;3．暨南大学-香港大学脑功能与健康联合实验室，广东广州510632)

何首乌含有二苯乙烯苷类、蒽醌类化合物等，具有抗氧化、抗衰老、保肝、调节免疫和降血脂等方面的生物学活性［1］。当前何首乌的研究大多都是集中在二苯乙烯苷类化合物的抗氧化和对神经作用的特性上［2］，特别是何首乌的其他主要成分是否具有神经方面作用尚未阐明，大黄素甲醚作为何首乌蒽醌类化合物的成分之一，对脑缺血具有保护作用，提示可对大黄素甲醚的神经元营养作用作进一步研究。本研究采用无血清体外培养原代皮质神经元来观察大黄素甲醚对皮质神经元的存活及促突起生长的作用，以阐明其是否具有神经营养作用。

1 材料

1．1 药品与试剂 DMSO(北京鼎国);大黄素甲醚(中国药品生物制品检定所);DMEM/F12(美国Gibco);B27添加剂(美国Gibco);多聚赖氨酸(相对分子量7～15万，美国Sigma);胰蛋白酶(美国Amersco);MTT(美国Sigma);胎牛血清(天津市灏洋生物制品科技);单克隆兔抗大鼠神经元特异性烯醇化酶(NSE，武汉博士德);单克隆小鼠抗大鼠微管相关蛋白2(MAP2，美国Sigma);牛血清白蛋白(BSA)(博大泰克);即用型SABC免疫组化试剂盒(武汉博士德);RT-PCR试剂盒(TaKaRa，批号:DRR019A);DNA Marker(TaKaRa);腺苷受体抑制剂 ZM241385(Tocris Bioscience，批号:13A/100775);酪氨酸激酶抑制剂 K252a(美国 Sigma，批号:BCBB3202)，其余试剂、药品均为国产分析纯。

1．2 动物 SPF级健康雌、雄SD大鼠，2～3月龄，体质量约200g，广东省实验动物中心，合格证号2007A003。

1．3 主要仪器 SW-CJ-1F型超净台(苏州净化设备)，IX71倒置显微镜(日本奥林巴斯)，24孔板、96孔板(美国Corning)，培养箱(英国Galaxy S)，酶标仪(美国BIO-RAD)。……