王燕坤 王 茜 武军驻 蔡洁明

基质小泡是细胞源性膜性成份,平均直径30mm-100nm，经常出现在肥大软骨，骨和牙齿等矿化组织内。含有天然或人工合成的磷脂的小泡即为脂质体。由于与生物膜很相似，近几年成为研究热点。例如非病毒基因载体[1]和载药系统[2]。另外，脂质体能像“微型反应器”一样提供一个相对保护性封闭的环境。脂质体的这个性质为其模拟基质小泡提供了可能性。因此以脂质体为工具来研究基质小泡介导的生物矿化有无可比拟的优点。

Pederson等应用合成的脂质体作为工具塑造热敏脂质体和温控自组装胶原形成可注射性前驱液[3]。但是其IF法合成脂质体体积远远大于基质小泡体积；存在胶原凝胶机械力不足；胶原降解速度快等缺点。

在前期研究[4]的基础上，本研究拟采用薄膜-超声法制备出小直径的载Ca2+和Pi脂质体模拟基质小泡，观察其特征并研究在早期龋模型上的应用。然而，在骨组织中矿化晶体是沉积在胶原纤维上，因此，我们将酸可溶性胶原引入，重建为矿化胶原溶液。

1.材料与方法

1.1 实验仪器和材料 RE-52A旋转蒸发仪(上海振捷实验设备有限公司，中国)、DM4000B正置显微镜(莱卡，德国)、S-4800型场发射扫描电镜(日立公司,日本)、DPPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱 ＞99%，Avanti Polar Lipids公司,美国)、DMPC(二肉豆蔻酰磷脂胆碱＞99%，Avanti Polar Lipids公司,美国)、CaCl2(分析纯，中国)、Na2HPO4(分析纯，中国)、自制大白鼠尾胶原等。

1.2 载Ca2+和Pi-脂质体的制备 采用逆向蒸发——超声法合成脂质体。将DPPC与DMPC按摩尔比9∶1混入烧瓶中，共20mg，向其中加入3ml氯仿。真空旋转蒸发形成一层薄膜。……