陈素雅 蔡华雄

牙髓细胞的增殖分化以及牙本质的修复与再生是多种生长因子、细胞外基质分子网络调控的结果。其中生长因子在许多重要环节起关键性作用。富血小板血浆(Platelet-rich plasma，PRP)是自体血浆中的高浓度的血小板，是一种富含血小板的血液制品，含有高浓度的生长因子、血小板和纤维素[1]，能促进细胞增殖、基质合成和血管生成。有研究证实，PRP促进骨细胞和成纤维细胞有增殖作用[2-3]。但PRP作为多种复合生长因子,其作用机制尚不十分明确，目前研究较多的是转移生长因子(transforming growth factor，TGF)和血小板来源生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)。本实验通过相关抗体的拮抗作用，分别屏蔽PRP中两种主要生长因子转移生长因子和血小板来源生长因子的功能，观察PRP中不同生长因子在大鼠牙髓细胞的增殖作用中发挥的效应。

1.材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 大鼠TGF-β1 ELISA试剂盒武汉博士德生物工程有限公司

大鼠PDGF-AB ELISA试剂盒 武汉博士德生物工程有限公司

大鼠TGF-β1抗体 武汉博士德生物工程有限公司

大鼠PDGF-AB抗体 武汉博士德生物工程有限公司

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 武汉博士德生物工程有限公司

CCK-8试剂盒 广州威佳科技有限公司

1.1.2 主要仪器和设备 Shellab 2323-2 CO2培养箱 SHELLAB

HERAguard HPH12超净工作台 THERMO

1.1.3 实验动物 清洁级SD大鼠，4周龄，性别不限，由中山大学实验动物中心提供。

1.2 试验方法

1.2.1 大鼠牙髓细胞的培养 取3-4周龄SD大鼠，性别不限，处死后解剖上下颌骨，超净工作台内解剖上下颌切牙，取出牙髓，酶消组织块法培养牙髓细胞，按1∶2比例进行传代，检测细胞来源并绘制细胞生长曲线，取第五代细胞进行实验。……