王 宇,戴佳琳,黄 江,廖兴江

2.贵阳医学院现代病原生物学实验室,贵阳 550004;

3.贵阳医学院多媒体形态学实验室,贵阳 550004

亚洲带绦虫60S核糖体蛋白L8基因的克隆表达和免疫学分析

王 宇1,2,戴佳琳3,黄 江1,廖兴江3

目的原核克隆表达亚洲带绦虫成虫60S核糖体蛋白L8基因(TaRPL8),探索其应用前景。方法用RT-PCR方法从亚洲带绦虫成虫cDNA中获取RPL8基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物通过SDS-PAGE进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明pET-28a(+)-TaRPL8重组质粒构建成功。SDS-PAGE结果表明目的基因在大肠埃希菌BL21/DE3中获得高效表达,亲和层析获得了高纯度蛋白。重组蛋白可被其免疫的SD大鼠血清识别但不能够被正常大鼠血清识别,表明其具有免疫原性。结论亚洲带绦虫成虫TaRPL8基因可在大肠埃希菌BL21/DE3中获得具有免疫原性的表达,为进一步的功能研究奠定了基础。

亚洲带绦虫;60S核糖体蛋白 L8基因;基因克隆;原核表达

2.贵阳医学院现代病原生物学实验室,贵阳 550004;

3.贵阳医学院多媒体形态学实验室,贵阳 550004

至上世纪70年代以来,在我国台湾地区、东南亚地区、和我国大陆地区相继报道了一种带绦虫,其成虫特征几乎和牛带绦虫一致,而囊尾蚴又与猪带绦虫极为相似。这种带绦虫的中间宿主是猪,人因生食猪肝等内脏而感染。这种带绦虫被命名为亚洲带绦虫[1-3]。近年来的研究证实在贵州省都匀地区存在亚洲带绦虫病的流行。……