宋瑞丽

(郑州铁路职业技术学院，河南 郑州 450052)

山药为薯蓣科植物薯蓣(Dioscorea opposita Thunb)的干燥根茎，主治脾虚食少，久泻不止，肺虚喘咳，肾虚遗精，带下，尿频，虚热消渴［1］等症。山药具有多种生物活性，并认为山药中的主要功效成分是山药多糖，有增强免疫、抗衰老、抗氧化活性、抗肿瘤、治疗糖尿病的效果［2］。水溶性浸出物中含有水溶性多糖、皂苷类、低聚糖、蛋白质以及氨基酸等，常被作为一项测定指标评价药材质量，通常采用药典附录XA方法进行含量测定。

本试验对来源于三个不同省的山药药材中多糖、水溶性浸出物进行了含量测定，为山药药材的质量评价提供了科学数据，为山药GAP基地的建设提供参考。

1 实验材料

1.1 样本来源及处理

2006年10月～2007年1月期间采自于河南、山西、河北三产地，由河南中医学院中药鉴定教研室主任陈随清教授鉴定为薯蓣科植物薯蓣的根茎。

取鲜品，切去根头，洗净，除去外皮和须根，趁鲜切厚片，干燥，备用。

1.2 仪器与化学试剂

UV－2201紫外可见分光光度计，(FA2004A)万分之一分析天平，CS101－2D电热鼓风干燥箱，RT201型粉碎机，R205旋转蒸发器，SZ－93自动双重水蒸馏器。

葡萄糖(北京化工厂，AR级)，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 实验方法

2.1 多糖的含量测定

大多采用分光光度法——苯酚硫酸法［3］进行含量测定。

2.1.1 标准曲线绘制

称取105℃干燥至恒重的葡萄糖50mg，精密称定，置于500ml量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得0.1012mg/ml的对照品溶液。精密吸收上述对照品溶液 1.0ml、3.0ml、5.0ml、7.0ml、10ml分别置于10ml容量瓶中，加水至刻度，混匀，配成系列标准溶液。分别准确吸取系列标准溶液1ml溶液于锥形瓶中，以蒸馏水1ml作空白，分别向其中加入5%苯酚1ml，混匀，迅速加入浓硫酸H2SO45ml充分混匀，放至室温，在489nm波长处测其吸收度值。在1.0120 ×10－2～0.10120mg/ml之间有良好的线性，线性方程:y=0.1152x+0.0018(R2=0.9999)。

2.1.2 供试品溶液的制备和含量测定

取山药粗粉20g，精密称定，置索氏提取器中，加入250ml石油醚90℃回流4h，取出样品挥干后，加入80%乙醇200ml(90℃)回流两次(每次两小时)，以除去单糖、多酚、低聚糖和苷类等小分子物质;将样品挥干溶剂后，加入200ml的水，80℃水浴提取两次，每次提取4小时，合并提取液，用旋转蒸发器真空浓缩至50ml，用sevage法除蛋白后，再次真空浓缩至20ml，加入95%乙醇(使乙醇浓度达80%)，静置过夜，滤过，残渣先后用无水乙醇、乙醚、丙酮依次洗涤，低温干燥得山药粗多糖，称重。精密称取山药粗多糖10mg，溶于100ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述溶液适量，置25ml容量瓶中，蒸馏水定容，即得供试品溶液。按照2.1.1项下的方法测定吸收度A，由回归方程计算浓度C。按下式计算山药中多糖的含量以葡萄糖计。

其中，W为样品的质量(g)，C为多糖浓度(mg/ml)，V为溶液的体积(ml)，D为稀释因素。

2.1.3 精密度试验

取供试品溶液1ml，共5份，按2.1.1项下方法操作测得其平均百分含量为18.86%，其RSD为1.67%。

表1 精密度试验结果

2.1.4 重现性试验

称取同一样品5份，各20g，精密称定，按2.1.2项下方法计算山药多糖的含量，检验此测定方法的重现性，RSD为1.77%。

表2 重现性试验结果

2.1.5 稳定性试验

取供试品溶液1ml，按2.1.1项下方法测定吸收度，每15分钟测定1次，考察其稳定性，结果显色后吸收度在1.5h内无明显变化，RSD为0.17%，说明苯酚－硫酸法显色稳定。

表3 稳定性试验结果

2.1.6 加样回收率试验

称取10g山药，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚脱脂，挥干溶剂，加80%乙醇索氏提取以除去单糖，低聚糖以及甙类。药渣挥干溶剂后，加入葡萄糖及蒸馏水，回流提取，其余操作方法同2.1.2项，测得平均回收率为 96.23%，RSD=1.63%(n=5)。

表4 加样回收率试验

2.1.7 样品中多糖的含量

按照2.1.2 制备供试品溶液，按 2.1.1 项下方法对来自三个省市的30份样品进行含量测定，每个样品的测定结果为3次测定平均值，结果见表5。

2.2 水溶性浸出物含量测定

按照中国药典2005版一部附录XA浸出物测定法(冷浸法)测定三个省市的30份样品进行含量测定，每个样品的测定结果为3次测定平均值，结果见表5。

3 结果分析

3.1 含量分析

比较来自三产地10批药材的成分，其中水溶性浸出物，河南、山西含量明显高于河北。多糖含量相差比较大，以河南整体最高。

3.2 道地性分析

河南武陟、温县属古怀庆府地带，以其特定的种质、产区、生产技术和加工方法，有道地产区之称。从数据资料显示，可把水溶性浸出物、多糖成分的含量做为考察山药道地性的指标，为道地药材的市场流通提供科学的保障。注:1－10号来自河南省，11－20号来自山西省，21－30号来自河北省。

表5 不同产地山药各成分的含量

3.3 地域环境分析

河南、山西、河北地理位置的差异，气候、土质、水质等生长环境不同，山药中的各成分都受到了影响。河北药材的整体含量偏低，这与生长的环境有很大关系。山西药材的整体含量相对于河北更接近于河南药材，这与山药自古以来在山西的长期种植有关。

4 结语

中药材生长讲究水土气候特殊的自然环境，不能随便“搬家”移植，否则，药材的质量就很难得到保证。中药材质量不稳定，药效下降，就无法确保临床用药的合理性。最近几年国家已投入大量经费促进了药材道地产区的发展，最大限度地满足市场的需求，让老百姓用到安全可靠的药材。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版(一部)［S］.中国医药科技出版社，2010:27.

［2］张红英.山药多糖研究进展［J］.河南中医学院学报，2006，21(127):87 －88.

［3］王东，林力，袁昌鲁，等.车前子多糖含量的分析［J］.中草药，2002，33(10):896 －897.