陈丽丽,黄靓妹,詹红艳,曹亦宾,张 宏

(唐山工人医院 1.神经内科;2.急诊内科,河北 唐山 063000）

癫痫是由于脑部神经元异常过度放电所致的突然、反复和短暂的中枢神经系统功能失常的慢性疾病和综合征。神经肽Y(neuropeptide-Y,NPY）是由36个氨基酸残基组成的多肽,广泛分布于哺乳动物中枢和外周神经系统,是含量最丰富的神经肽之一。研究发现NPY与癫痫密切相关,癫痫发作后海马中NPY释放量明显增多,且对癫痫有保护作用。丹参多酚酸盐注射液是国家二类中药新药。自2005年5月获批应用以来,证实它具有抗血小板聚集、抗血栓形成、改善微循环、抗氧化损伤的作用。本课题拟采用免疫组织化学方法观察PILO所致大鼠NPY的表达,探讨丹参多酚酸盐及NPY干预注射对海马NPY的表达影响研究,进一步探讨内在抗癫痫机制及外在抗癫痫药物的作用,为癫痫治疗提供形态学依据。

1 材料和方法

1.1 材料

健康雄性成年Wistra大鼠20只,体重200-250 g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。将动物置于20℃、安静的环境中饲养。匹鲁卡品(PILO）,美国SIGMA公司;神经肽Y,美国SIGMA公司;兔抗大鼠NPY蛋白质多克隆抗体,武汉博士德公司;SABC免疫组化试剂盒,武汉博士德公司。

1.2 方法

1.2.1 实验动物分组 随机分为(1）NPY干预组5只,用2%戊巴比妥钠0.1 m/50 g将大鼠麻醉,立体定位仪上固定,依次切开皮肤、皮下组织,钝性分离骨筋膜,按大鼠解剖图谱Fig22取前囟后2.0 mm、左旁开1.0 mm,手术刀钻开颅骨,校准微量进样器垂直度后,抽取NPY 10 μ l(即6 nmol）,垂直进针至硬脑膜下3.5 mm(左侧脑室）,缓慢注射,于10-15 min内……